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【求助/交流】重组载体构建
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[交流]
【求助/交流】重组载体构建
各位虫友,鄙人想构建一个重组载体,用于原核表达,启动子和报告基因都要自己插入到载体中。请问是不是必须在启动子和报告基因之间加入核糖体结合序列(rbs)?有没有哪位大虾做过这方面的,请给予指点。
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2010-01-08 10:20:52
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引用回帖:
Originally posted by
gyesang
at 2010-1-8 13:27:
最好还是加上RBS吧,这样表达的效率会高点,RBS序列也不长,直接修饰在引物上就可以
RBS的设计有什么原则没?有的载体上是AGGAGG,有的是GACGAG等,不会富含G就可以吧。
[
Last edited by 更深的蓝 on 2010-1-8 at 14:45
]
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2010-01-08 14:37:22
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1-8 14:35
1949stone(金币
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1-8 18:24
最好还是加上RBS吧,这样表达的效率会高点,RBS序列也不长,直接修饰在引物上就可以
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2010-01-08 13:27:21
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更深的蓝(金币
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1-9 15:54
应该取决于你的启动子序列 NCBI上启动子后面CDS前面应该有一段RBS
不是加不加的问题,是一定要加RBS 否则影响翻译
[
Last edited by xiangao on 2010-1-9 at 11:41
]
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2010-01-09 11:38:02
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引用回帖:
Originally posted by
xiangao
at 2010-1-9 11:38:
应该取决于你的启动子序列 NCBI上启动子后面CDS前面应该有一段RBS
不是加不加的问题,是一定要加RBS 否则影响翻译
[
Last edited by xiangao on 2010-1-9 at 11:41
]
我在有些文献中发现,他们的启动子序列中有RBS和起始密码子ATG,如果在启动子后面再加上报告基因,能正确表达出目的蛋白吗?
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2010-01-09 15:58:49
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