应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】重组载体构建
汕头大学海洋科学接受调剂
71/1返回列表
查看: 760  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

更深的蓝

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】重组载体构建

各位虫友，鄙人想构建一个重组载体，用于原核表达，启动子和报告基因都要自己插入到载体中。请问是不是必须在启动子和报告基因之间加入核糖体结合序列（rbs）？有没有哪位大虾做过这方面的，请给予指点。
回复此楼

» 猜你喜欢
低调务实！
1楼 2010-01-08 10:20:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
★ ★
更深的蓝(金币+1,VIP+0): 1-8 14:35
1949stone(金币+1,VIP+0): 1-8 18:24
最好还是加上RBS吧，这样表达的效率会高点，RBS序列也不长，直接修饰在引物上就可以
赞一下(14人) 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2010-01-08 13:27:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

更深的蓝

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by gyesang at 2010-1-8 13:27:
最好还是加上RBS吧，这样表达的效率会高点，RBS序列也不长，直接修饰在引物上就可以

RBS的设计有什么原则没？有的载体上是AGGAGG，有的是GACGAG等，不会富含G就可以吧。

[ Last edited by 更深的蓝 on 2010-1-8 at 14:45 ]
赞一下 回复此楼
低调务实！
3楼2010-01-08 14:37:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiangao

金虫 (正式写手)
★ ★
更深的蓝(金币+2,VIP+0): 1-9 15:54
应该取决于你的启动子序列    NCBI上启动子后面CDS前面应该有一段RBS
不是加不加的问题，是一定要加RBS 否则影响翻译

[ Last edited by xiangao on 2010-1-9 at 11:41 ]
赞一下(4人) 回复此楼
4楼2010-01-09 11:38:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

更深的蓝

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by xiangao at 2010-1-9 11:38:
应该取决于你的启动子序列    NCBI上启动子后面CDS前面应该有一段RBS
不是加不加的问题，是一定要加RBS 否则影响翻译

[ Last edited by xiangao on 2010-1-9 at 11:41 ]

我在有些文献中发现，他们的启动子序列中有RBS和起始密码子ATG，如果在启动子后面再加上报告基因，能正确表达出目的蛋白吗？
赞一下 回复此楼
低调务实！
5楼2010-01-09 15:58:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiangao

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 更深的蓝 at 2010-1-9 15:58:

我在有些文献中发现，他们的启动子序列中有RBS和起始密码子ATG，如果在启动子后面再加上报告基因，能正确表达出目的蛋白吗？

按理说可以   不过要避免移码突变
赞一下 回复此楼
6楼2010-01-09 20:51:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
★
更深的蓝(金币+1,VIP+0): 1-11 09:03
引用回帖:
Originally posted by xiangao at 2010-1-9 11:38:
应该取决于你的启动子序列    NCBI上启动子后面CDS前面应该有一段RBS
不是加不加的问题，是一定要加RBS 否则影响翻译

[ Last edited by xiangao on 2010-1-9 at 11:41 ]

最好的方法是，你参考别人的原核表达载体，想pET系列和pQE系列
赞一下(3人) 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
7楼2010-01-10 17:30:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 更深的蓝 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 291分调剂 +8 上岸小莹加油 2026-04-09 9/450 2026-04-15 00:41 by zzzggc
[考研] 335求调剂 +19 想上岸呀！！ 2026-04-12 21/1050 2026-04-14 16:23 by Art1977
[考研] 求调剂 +12 璃茉一定上岸 2026-04-10 13/650 2026-04-14 00:08 by Equinoxhua
[考研] 材料考研调剂 +29 云木达达 2026-04-11 31/1550 2026-04-13 13:32 by lyh鲁老师
[考研] 一志愿0807 数一英一 313 有没有二轮调剂 +12 emokidd 2026-04-08 13/650 2026-04-13 08:32 by lhj2009
[考研] 322求调剂，08工科 +4 今天是个小号 2026-04-08 4/200 2026-04-13 00:20 by baobaoye
[考研] 2本，初试303，0860求调剂 +6 floriea 2026-04-12 8/400 2026-04-12 18:13 by zhouxiaoyu
[考研] 求调剂 +16 张番茄不炒蛋 2026-04-10 17/850 2026-04-12 13:58 by 熬夜成！
[考研] 296求调剂 +14 汪！？！ 2026-04-10 16/800 2026-04-12 10:48 by zhouyuwinner
[考研] 电气工程专硕320求调剂 +5 小麻子111 2026-04-10 5/250 2026-04-12 10:47 by zhouyuwinner
[考研] 求调剂，一志愿材料科学与工程985，365分， +8 材化李可 2026-04-11 10/500 2026-04-12 08:42 by 852137818
[考研] 296求调剂 +14 汪！？！ 2026-04-08 15/750 2026-04-11 20:28 by dongdian1
[考研] 本人女孩 +7 吼吼， 2026-04-10 9/450 2026-04-11 14:45 by ACS Nano——
[考研] 085501机械专硕 302分 不挑专业求调剂 +7 汪某. 2026-04-09 7/350 2026-04-11 14:37 by luhong1990
[考研] 085402通信工程调剂，有4项学科竞赛国奖（电赛国二），硕士研究生调剂自荐信。 +5 m永o不v言o弃m 2026-04-09 5/250 2026-04-11 09:33 by zhq0425
[考研] 289 分105500药学专硕求调剂(找B区学校) +6 白云123456789 2026-04-09 8/400 2026-04-10 21:13 by zhouxiaoyu
[考研] 初试分332，一志愿报考西北工业大学， +11 故人?? 2026-04-09 11/550 2026-04-09 21:54 by JineShine
[考研] 332，085601求调剂 +12 ydfyh 2026-04-09 14/700 2026-04-09 17:28 by wp06
[考研] 086004 求调剂 309 +7 Yin DY 2026-04-08 7/350 2026-04-09 13:59 by Delta2012
[考研] 086000生物与医药调剂 +7 awwwwwooooo 2026-04-09 7/350 2026-04-09 13:31 by 北极159263
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭