24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 597  |  回复: 9
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

yygz5128

[交流] 【求助/交流】求救-新基因的克隆

我现在正在克隆一个新基因,根据其已知的氨基酸序列通过兼并PCR的方法已经获得中间的部分序列(没有同源性,只知道氨基酸序列),买了CLOTECH的RACE试剂盒想获得全长CDNA,一直没有结果,请问还有哪些比较好的末端克隆的方法,请高手们指教,万分感谢
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yygz5128

引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-1-6 16:23:
clontech的盒子足够好了,一定可以做出来的,可以多设计几个引物,一次出不来,做巢式PCR,多种组合的巢式PCR
一般情况3’-RACE比较容易,但是5‘-RACE可能相对困难,但是用clontech的盒子很好用,问题不大
另外 ...

你说的我都试了,引物差不多设计了10对了,一直没有结果,巢式PCR也只是模糊的一片,哎,郁闷了
5楼2010-01-17 22:38:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

liuyanyy

新虫 (正式写手)

通过染色体步移的方法
2楼2010-01-05 23:33:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
clontech的盒子足够好了,一定可以做出来的,可以多设计几个引物,一次出不来,做巢式PCR,多种组合的巢式PCR
一般情况3’-RACE比较容易,但是5‘-RACE可能相对困难,但是用clontech的盒子很好用,问题不大
另外注意设计引物的时候避免以A结尾,尽量以T结尾
3楼2010-01-06 16:23:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yygz5128

也尝试了染色体步移的方法,值得到部分序列,连已知的序列都没有全部出来,奇怪了
4楼2010-01-17 22:36:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085408光电信息工程专硕355一志愿长春光机所调剂 +6 王ymaa 2026-04-13 13/650 2026-04-14 11:33 by 王ymaa
[考研] 一志愿鲁东大学071000生物学学硕初试分数276求调剂 +21 慕绝cc 2026-04-09 25/1250 2026-04-14 11:26 by 不我拉绿卡
[考研] 245求调剂 +6 冰糖橘?汽水 2026-04-13 10/500 2026-04-14 10:49 by jyl0317
[考研] 288求调剂,一志愿华南理工大学071005 +24 ioodiiij 2026-04-08 24/1200 2026-04-14 08:42 by nana_zhong
[考研] 284求调剂 +16 让我上岸吧阿西 2026-04-09 16/800 2026-04-13 22:18 by pies112
[考研] 一志愿085502,267分求调剂 +18 再忙也要吃饭啊 2026-04-08 19/950 2026-04-13 21:27 by wunaiy88
[考研] 一志愿华工085600 331分 +7 天下ww 2026-04-09 7/350 2026-04-13 09:01 by lhj2009
[考研] 一志愿中国科学院上海有机所,有机化学356分找调剂 +12 Nadiums 2026-04-09 12/600 2026-04-13 08:50 by lhj2009
[考研] 277 数一104,学硕,求调剂 +21 瓶子PZ 2026-04-09 23/1150 2026-04-11 23:12 by labixiaoqiao
[考研] 求调剂,一志愿大连理工大学354分 +5 雨声余生 2026-04-11 6/300 2026-04-11 16:12 by 雨声余生
[考研] 085410 273分调剂 +4 X1999 2026-04-09 4/200 2026-04-11 13:05 by pies112
[考研] 293求调剂 +6 勇远库爱314 2026-04-08 6/300 2026-04-11 10:08 by zhq0425
[考研] 284求调剂 +12 archer.. 2026-04-10 13/650 2026-04-11 08:44 by zhq0425
[考研] 一志愿京区985,085401电子信息,本科电子信息 +3 阳光开朗的男孩 2026-04-10 3/150 2026-04-10 16:29 by sophia_93
[考研] 一志愿华东师范生物学326分,求调剂 +8 刘墨墨 2026-04-09 8/400 2026-04-10 12:00 by pengliang8036
[考研] 348求调剂 +3 candyyyi 2026-04-09 3/150 2026-04-09 17:20 by 段伟艳
[考研] 086004 求调剂 309 +7 Yin DY 2026-04-08 7/350 2026-04-09 13:59 by Delta2012
[考研] 电子信息346 +4 zuoshaodian 2026-04-08 4/200 2026-04-08 11:54 by zzucheup
[考研] 机械调剂 +3 zzzbcb 2026-04-07 3/150 2026-04-07 22:19 by hemengdong
[考研] 318求调剂 +5 李青山山山 2026-04-07 5/250 2026-04-07 18:24 by 蓝云思雨
信息提示
请填处理意见