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[交流]
【求助/交流】PCR非特异性扩增,望高手指教
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最近一直在做PCR,体系和反应条件换了几次,还是没有出现目的条带,望高手指点迷津! 我的PCR反应体系: 10Xbuffer 2.5ul MgCl2(25mmol/L ) 2.0ul dNTP(2.5mmol/L ) 1.0ul 上下游引物(10mmol/L )各 0.5ul Taq酶(5U/ul) 0.5ul 模板 (真菌基因组DNA) 2.0ul 加双蒸水至 25ul PCR反应条件 94°,10min 94°,1min 68°,1min 35cycle 72°,10min 引物 primer(Oligo6.2): 上游:5' ATGTCCGAGCGACCCTCCGATCTTGTAGTC 3'(30bp) 下游:5' TCACGCCTCTAACATGCCATACTCTTTCTC 3'(30bp) |
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2楼2010-01-05 17:20:30
jasco
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3楼2010-01-05 17:27:00
jasco
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4楼2010-01-05 17:28:43
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6楼2010-01-05 20:33:49
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7楼2010-01-05 20:35:04
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