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【求助/交流】PCR非特异性扩增，望高手指教
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最近一直在做PCR,体系和反应条件换了几次，还是没有出现目的条带，望高手指点迷津！ 我的PCR反应体系： 10Xbuffer 2.5ul MgCl2（25mmol/L ） 2.0ul dNTP（2.5mmol/L ） 1.0ul 上下游引物（10mmol/L ）各 0.5ul Taq酶(5U/ul) 0.5ul 模板 (真菌基因组DNA) 2.0ul 加双蒸水至 25ul PCR反应条件 94°，10min 94°，1min 68°，1min 35cycle 72°，10min 引物 primer(Oligo6.2): 上游：5' ATGTCCGAGCGACCCTCCGATCTTGTAGTC 3'(30bp) 下游：5' TCACGCCTCTAACATGCCATACTCTTTCTC 3'(30bp) |
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2楼2010-01-05 17:20:30
jasco
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3楼2010-01-05 17:27:00
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