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elfreda

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】抗氧化实验困惑,求解

本人做菌物粗提物的抗氧化实验中发现,用紫外分光光度计测出的A值怎么会大多都是负值啊,虽然值是负的,但是却有量效关系,我该怎么办啊,就这样写在论文上可以么?我做的是清除羟自由基的。
   求高手解惑啊。
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elfreda

银虫 (小有名气)

补充下,我得空白值也是负的(试验中要求测出空白的值),我是不是要把空白的值调成正值,这样有的样品测出的A值就会是正值了
2楼2009-12-27 14:10:26
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svidy

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
狼狼晴空(金币+2,VIP+0):谢谢交流 12-27 19:19
我虽然没有做过抗氧化的实验,不过我觉得可能有几个原因吧
不知道你进行仪器的调零操作没有,应该是用溶剂调零后来测
否则别人之前别的调零和你的溶解溶剂不一致,有可能造成负值的
好比你用蒸馏水溶解的,就用蒸馏水调零
这次你的数据整齐的话都可以不用重做了,找到你之前的溶剂,在原来的条件下测定一下A值,然后所有的数据统一加上溶剂的A值,应该没错的
如果不行,你只好重新做喽
3楼2009-12-27 19:14:36
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狼狼晴空

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
正常!我测得也都是负的!这个实验感觉还不太健全!适当虚拟
4楼2009-12-27 20:09:37
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elfreda

银虫 (小有名气)

谢谢大家!
5楼2009-12-27 21:20:41
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zzhshan911

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
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karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供! 12-28 00:10
羟自由基清除活性
空白管:1 mL水+0.5 mL EDTA-Fe+1 mL PBS+1 mL番红花+1 mL 双氧水
对照管:1 mL水+0.5 mL EDTA-Fe+1 mL PBS+1 mL番红花+1 mL PBS
样品管:1 mL样品+0.5 mL EDTA-Fe+1 mL PBS+1 mL番红花+1 mL 双氧水
加完后摇匀在37˚C水浴反应30min,520nm测定吸光度。
其中PBS缓冲液(150mM,pH=7.4),番红花(360微克/mL),H2O2(3%), EDTA-Fe(2mM)。
EDTA-Fe和样品需要水溶,其余用PBS溶解。
  清除率=A(样品)/A(对照)

我就是是用上述实验做得,做得很正常。本实验中,空白必须变无色,对照不变色,并且是全部管中吸光度值最大的。
6楼2009-12-27 21:39:13
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elfreda

银虫 (小有名气)

请问你的空白值是正值么
7楼2009-12-28 10:57:42
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myselfsky8159

木虫 (著名写手)

★ ★
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karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教! 12-28 19:43
你可以把样品稀释下,有可能是样品浓度太高,清除自由基效果太好了,最后就有可能是负值,另外在用分光光度计之前,要调好机器,做好空白对照,再做几组平行实验。
8楼2009-12-28 10:59:56
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elfreda

银虫 (小有名气)

我得空白为;硫酸铜30微升,磷酸钠盐缓冲液3毫升
对照:硫酸铜30微升,磷酸钠盐缓冲液3毫升,维生素c30微升,细胞色素c60微升
待测物:硫酸铜30微升,磷酸钠盐缓冲液3毫升,维生素c30微升,细胞色素c60微升,样品0.5毫升
不知我这样做是不是会有什么问题?因为需要知道空白组的值,所以是不是应该用磷酸钠盐缓冲液调零?请大家指导
9楼2009-12-28 11:14:01
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fjtcm8772

金虫 (小有名气)

楼主做内生真菌?
10楼2009-12-29 09:20:06
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