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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » 【求助】抗氧化实验困惑，求解
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elfreda

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】抗氧化实验困惑，求解

本人做菌物粗提物的抗氧化实验中发现，用紫外分光光度计测出的A值怎么会大多都是负值啊，虽然值是负的，但是却有量效关系，我该怎么办啊，就这样写在论文上可以么？我做的是清除羟自由基的。
   求高手解惑啊。
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1楼 2009-12-27 13:44:58
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elfreda

银虫 (小有名气)
补充下，我得空白值也是负的（试验中要求测出空白的值），我是不是要把空白的值调成正值，这样有的样品测出的A值就会是正值了
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2楼2009-12-27 14:10:26
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svidy

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
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狼狼晴空(金币+2,VIP+0):谢谢交流 12-27 19:19
我虽然没有做过抗氧化的实验，不过我觉得可能有几个原因吧
不知道你进行仪器的调零操作没有，应该是用溶剂调零后来测
否则别人之前别的调零和你的溶解溶剂不一致，有可能造成负值的
好比你用蒸馏水溶解的，就用蒸馏水调零
这次你的数据整齐的话都可以不用重做了，找到你之前的溶剂，在原来的条件下测定一下A值，然后所有的数据统一加上溶剂的A值，应该没错的
如果不行，你只好重新做喽
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3楼2009-12-27 19:14:36
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狼狼晴空

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
正常！我测得也都是负的！这个实验感觉还不太健全！适当虚拟
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4楼2009-12-27 20:09:37
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elfreda

银虫 (小有名气)
谢谢大家！
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5楼2009-12-27 21:20:41
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zzhshan911

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★
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karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供！ 12-28 00:10
羟自由基清除活性
空白管：1 mL水+0.5 mL EDTA-Fe+1 mL PBS+1 mL番红花+1 mL 双氧水
对照管：1 mL水+0.5 mL EDTA-Fe+1 mL PBS+1 mL番红花+1 mL PBS
样品管：1 mL样品+0.5 mL EDTA-Fe+1 mL PBS+1 mL番红花+1 mL 双氧水
加完后摇匀在37˚C水浴反应30min，520nm测定吸光度。
其中PBS缓冲液（150mM,pH=7.4）,番红花(360微克/mL）,H2O2（3%）, EDTA-Fe(2mM)。
EDTA-Fe和样品需要水溶，其余用PBS溶解。
  清除率=A（样品）/A（对照）

我就是是用上述实验做得，做得很正常。本实验中，空白必须变无色，对照不变色，并且是全部管中吸光度值最大的。
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6楼2009-12-27 21:39:13
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elfreda

银虫 (小有名气)
请问你的空白值是正值么
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7楼2009-12-28 10:57:42
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myselfsky8159

木虫 (著名写手)
★ ★
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karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！ 12-28 19:43
你可以把样品稀释下，有可能是样品浓度太高，清除自由基效果太好了，最后就有可能是负值，另外在用分光光度计之前，要调好机器，做好空白对照，再做几组平行实验。
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8楼2009-12-28 10:59:56
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elfreda

银虫 (小有名气)
我得空白为；硫酸铜30微升，磷酸钠盐缓冲液3毫升
对照：硫酸铜30微升，磷酸钠盐缓冲液3毫升，维生素c30微升，细胞色素c60微升
待测物：硫酸铜30微升，磷酸钠盐缓冲液3毫升，维生素c30微升，细胞色素c60微升，样品0.5毫升
不知我这样做是不是会有什么问题？因为需要知道空白组的值，所以是不是应该用磷酸钠盐缓冲液调零？请大家指导
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9楼2009-12-28 11:14:01
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fjtcm8772

金虫 (小有名气)
楼主做内生真菌？
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10楼2009-12-29 09:20:06
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