24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 591  |  回复: 7
当前主题已经存档。

xtaqo045

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】基因克隆

帮帮忙,请问高手们,
我做酶基因克隆,挑取阳性菌落做菌落PCR,得出的基因片段是我所要的目的基因的两倍(我要的目的基因900-1000kb,而菌落PCR出来的却是2000kb);我又从阳性菌落中提取质粒,用质粒PCR出来的结果也是2000kb的基因片段,为什么会出现这样的结果?我该怎么办呢?请您们帮帮忙!谢谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

thinka

铜虫 (著名写手)

★ ★
xtaqo045(金币+2,VIP+0): 12-24 13:27
你先说说你用的什么载体?菌落用的什么引物?
2楼2009-12-24 13:12:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xtaqo045

金虫 (小有名气)


1949stone(金币+1,VIP+0): 12-24 21:06
pUM-T载体,引物使自己设计的,引物一直都很好用
3楼2009-12-24 13:26:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)


xtaqo045(金币+1,VIP+0): 12-24 20:18
估计不是目的片段。可以测序看看是什么
漫洒英雄泪,相离处士家。谢慈悲剃度在莲台下。没缘法转眼分离乍。赤条条来去无牵挂。那里讨烟蓑雨笠卷单行?一任俺芒鞋破钵随缘化!
4楼2009-12-24 13:57:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

thinka

铜虫 (著名写手)


xtaqo045(金币+1,VIP+0): 12-24 20:18
自连的时候带多大啊?加上你的片段有2000么?不要忘了自载体自己的一部分序列哦
5楼2009-12-24 19:56:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
amisking(金币+2,VIP+0): 12-24 22:30
你PCR验证时设计的引物位点在哪里?如果是在质粒上分别在前后加了序列的话也有可能的。还有就是你目的基因PCR的时候大小正确吗?
6楼2009-12-24 21:38:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

super1998

金虫 (小有名气)


xtaqo045(金币+1,VIP+0): 12-29 10:41
先不要用通用引物扩。直接用目的基因两端引物扩一下,如果还是大很多,那肯定不是,
123
7楼2009-12-24 23:25:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wt414441794

铁虫 (正式写手)

xtaqo045(金币+5): 2010-03-09 10:44
好好学习
8楼2010-03-09 09:45:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xtaqo045 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 复试调剂 +19 积极向上; 2026-04-10 21/1050 2026-04-15 08:25 by 不我拉绿卡
[考研] 求调剂 +12 何气正 2026-04-13 13/650 2026-04-14 14:47 by zs92450
[考研] 材料085601调剂 +32 何润采123 2026-04-10 34/1700 2026-04-14 08:47 by 木木mumu~
[考研] 求调剂 +12 璃茉一定上岸 2026-04-10 13/650 2026-04-14 00:08 by Equinoxhua
[考研] 一志愿西交机械专硕求调剂 +9 求上岸的小王 2026-04-10 9/450 2026-04-13 16:08 by jiangguiquan11
[考研] 346分,工科0854求调剂,专硕 +6 moser233 2026-04-12 7/350 2026-04-12 22:11 by fqwang
[考研] 322求调剂 +6 123安康 2026-04-12 13/650 2026-04-12 15:51 by 123安康
[考研] 调剂求助 +6 果然有我 2026-04-11 7/350 2026-04-11 16:22 by 明月此时有
[考研] 296求调剂 +6 汪!?! 2026-04-09 6/300 2026-04-11 11:25 by zhq0425
[考研] 0854调剂 +8 950824he@ 2026-04-09 8/400 2026-04-11 10:11 by zhq0425
[考研] 085402通信工程调剂,有4项学科竞赛国奖(电赛国二),硕士研究生调剂自荐信。 +5 m永o不v言o弃m 2026-04-09 5/250 2026-04-11 09:33 by zhq0425
[考研] 考研调剂 +26 硕星赴 2026-04-09 27/1350 2026-04-10 22:24 by 猪会飞
[考研] 289 分105500药学专硕求调剂(找B区学校) +6 白云123456789 2026-04-09 8/400 2026-04-10 21:13 by zhouxiaoyu
[考研] 计算机类求调剂,22408-274分 +7 上岸de小虫 2026-04-09 8/400 2026-04-10 19:56 by fxue1114
[考研] 调剂 +19 2261744733 2026-04-08 19/950 2026-04-09 19:11 by vgtyfty
[考研] 材料专硕初试分332一志愿西北工业大学, +12 故人?? 2026-04-09 12/600 2026-04-09 18:34 by Ccclqqq
[论文投稿] 求助文献原文 10+3 18500821399 2026-04-08 3/150 2026-04-09 16:56 by 北京莱茵润色
[考研] 化学工程与技术专业一志愿哈工程 291分B区 国家级大创负责人 有一作论文 +13 Emmy~ 2026-04-09 13/650 2026-04-09 14:47 by only周
[考研] 086000生物与医药调剂 +7 awwwwwooooo 2026-04-09 7/350 2026-04-09 13:31 by 北极159263
[考研] 二次调剂求老师收留 +3 笑笑袁 2026-04-08 3/150 2026-04-08 23:50 by 醉在风里
信息提示
请填处理意见