24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 572  |  回复: 7
当前主题已经存档。

xtaqo045

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】基因克隆

帮帮忙,请问高手们,
我做酶基因克隆,挑取阳性菌落做菌落PCR,得出的基因片段是我所要的目的基因的两倍(我要的目的基因900-1000kb,而菌落PCR出来的却是2000kb);我又从阳性菌落中提取质粒,用质粒PCR出来的结果也是2000kb的基因片段,为什么会出现这样的结果?我该怎么办呢?请您们帮帮忙!谢谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

thinka

铜虫 (著名写手)

★ ★
xtaqo045(金币+2,VIP+0): 12-24 13:27
你先说说你用的什么载体?菌落用的什么引物?
2楼2009-12-24 13:12:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xtaqo045

金虫 (小有名气)


1949stone(金币+1,VIP+0): 12-24 21:06
pUM-T载体,引物使自己设计的,引物一直都很好用
3楼2009-12-24 13:26:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)


xtaqo045(金币+1,VIP+0): 12-24 20:18
估计不是目的片段。可以测序看看是什么
漫洒英雄泪,相离处士家。谢慈悲剃度在莲台下。没缘法转眼分离乍。赤条条来去无牵挂。那里讨烟蓑雨笠卷单行?一任俺芒鞋破钵随缘化!
4楼2009-12-24 13:57:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

thinka

铜虫 (著名写手)


xtaqo045(金币+1,VIP+0): 12-24 20:18
自连的时候带多大啊?加上你的片段有2000么?不要忘了自载体自己的一部分序列哦
5楼2009-12-24 19:56:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
amisking(金币+2,VIP+0): 12-24 22:30
你PCR验证时设计的引物位点在哪里?如果是在质粒上分别在前后加了序列的话也有可能的。还有就是你目的基因PCR的时候大小正确吗?
6楼2009-12-24 21:38:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

super1998

金虫 (小有名气)


xtaqo045(金币+1,VIP+0): 12-29 10:41
先不要用通用引物扩。直接用目的基因两端引物扩一下,如果还是大很多,那肯定不是,
123
7楼2009-12-24 23:25:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wt414441794

铁虫 (正式写手)

xtaqo045(金币+5): 2010-03-09 10:44
好好学习
8楼2010-03-09 09:45:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xtaqo045 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料考研调剂 +23 云木达达 2026-04-11 25/1250 2026-04-11 17:50 by tj2m
[考研] 308求调剂 +3 VvvvL 2026-04-10 3/150 2026-04-11 15:32 by xiangxu
[考研] 291分调剂 +4 上岸小莹加油 2026-04-09 5/250 2026-04-11 11:49 by zhq0425
[考研] 295求调剂 +3 桂秋二十八 2026-04-05 5/250 2026-04-11 11:36 by zhq0425
[考研] 一志愿211生物学280分 求调剂 +7 李rien 2026-04-05 7/350 2026-04-11 11:16 by 逆水乘风
[考研] 086003调剂求助 +20 苏弋万 2026-04-09 21/1050 2026-04-11 11:01 by zhq0425
[考研] 275求调剂 +9 1624447980 2026-04-08 10/500 2026-04-11 10:20 by Delta2012
[考研] 求调剂 +5 不会飞的鱼@ 2026-04-10 5/250 2026-04-10 19:07 by chemisry
[考研] 336材料与化工085600求调剂 +21 水星记infp 2026-04-05 24/1200 2026-04-10 15:28 by luoyongfeng
[基金申请] 有爆料,一个青年教师卖房得400万,然后换了一个四青帽子 +9 babu2015 2026-04-08 9/450 2026-04-10 11:43 by 苏东坡二世
[考研] 一志愿华中农微生物,288分,三年实验经历 +10 代fish 2026-04-09 10/500 2026-04-10 09:49 by potato妹
[考研] 求机械专硕297第二批调剂 +5 拾柒12。 2026-04-08 5/250 2026-04-09 16:43 by 允当适度
[考研] 286求调剂 +19 Faune 2026-04-08 20/1000 2026-04-09 08:36 by 哦哦123
[考研] 一志愿华南师范大学0702物理学305调剂 +4 念常安 2026-04-07 6/300 2026-04-08 22:53 by bljnqdcc
[考研] 材料与化工专硕306分找合适调剂 +27 沧海轻舟e 2026-04-06 28/1400 2026-04-08 22:06 by wdyheheeh
[考研] 312求调剂 +4 Say Never 2026-04-04 4/200 2026-04-08 08:41 by barlinike
[考研] 307求调剂 +14 超级伊昂大王 2026-04-06 14/700 2026-04-08 07:03 by 无际的草原
[考博] 博士申请 +3 IQwQl 2026-04-05 3/150 2026-04-07 20:31 by greychen00
[考研] 316求调剂 +7 yyx想调剂 2026-04-05 7/350 2026-04-07 14:31 by shdgaomin
[考研] 308求调剂 +3 终不似从前 2026-04-05 3/150 2026-04-05 20:07 by 啵啵啵0119
信息提示
请填处理意见