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thunderay

铁杆木虫 (小有名气)

[交流] 【求助】关于FLD检测器的影响因素

最近刚刚开始接触FLD,因为正好需要用FLD来做一个大鼠的血浆样品分析,这周先用溶液试了一下,发现到100ng/ml的时候就很那检测出来,想请教一下熟悉FLD检测器的战友,一般流动相中的什么部分容易对检测信号造成影响呢?我用的乙酸铵和乙腈的流动相,也有人推荐水相为乙酸或者磷酸,这些有什么影响呢?我用的检测波长是230~280
传说FLD可以做到0.1ng,也有不少paper的LLOQ达到1ng/ml,发现好难好难。。。
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thunderay

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by y_0622 at 2009-12-25 09:36:

检测条件一样,而检测效果不一样,可能该色谱没做过普适实验,怀疑该色谱条件室间差异较大,首先确定下泵、柱子、检测器、流动相条件是否与文献色谱条件一致(最好厂家一致),其次如果怀疑流动相干扰,换进口试 ...

现在的主要问题是,在低波长下,即时不走流动相,不上柱子,也会基线不平,有0.2LU左右的波动。。。而换成高波长,比如300nm的激发波长,就没有任何问题。。。
8楼2009-12-25 14:23:30
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tianxue.1202

银虫 (小有名气)


狼狼晴空(金币+1,VIP+0):多谢交流 12-23 20:22
我们用的是乙腈的,楼主可以到网上搜看看啊,应该会有收获的
2楼2009-12-23 12:28:47
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ddw888

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
狼狼晴空(金币+2,VIP+0):感谢交流 12-23 20:22
thunderay(金币+3,VIP+0): 12-23 22:02
1.你的样品本身荧光强吗,谁说荧光灵敏度一定高。
2.波长有无扫描
3.注意流动相对荧光造成淬灭,但通常情况不会
4.pH的影响较大
3楼2009-12-23 13:55:53
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thunderay

铁杆木虫 (小有名气)

样品有荧光吸收的,不少文献报道也是用的荧光,是不是因为220到280的波长太短导致基线容易不平?发现跑很久也跑不平啊。。。
因为有相关参考文献(SCI)做到1ng/ml,但是我100ng做起来也很困难,主要是基线不平。。。波动在0.3-0.7LU之间。。。感觉实在太大了。。。
4楼2009-12-23 15:28:07
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