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thunderay铁杆木虫 (小有名气)
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【求助】关于FLD检测器的影响因素
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最近刚刚开始接触FLD，因为正好需要用FLD来做一个大鼠的血浆样品分析，这周先用溶液试了一下，发现到100ng/ml的时候就很那检测出来，想请教一下熟悉FLD检测器的战友，一般流动相中的什么部分容易对检测信号造成影响呢？我用的乙酸铵和乙腈的流动相，也有人推荐水相为乙酸或者磷酸，这些有什么影响呢？我用的检测波长是230~280 传说FLD可以做到0.1ng，也有不少paper的LLOQ达到1ng/ml，发现好难好难。。。 |
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thunderay(金币+5,VIP+0): 12-23 22:01
| 我的感觉：使用荧光或者电化学要求试剂纯度比较重要，血样本身样本基线就不易稳定，这与提取方法有很大关系，如果直接溶剂溶解离心进样往往干扰很多，这时候最好提取一下，至于为什么别人的文献检测灵敏度那么高，而你的很低，排除其他因素，估计是与试剂、仪器有关，在泵与检测器、试剂方面确实国外的比较好，信噪比如果按3/1算的话，看看你的最低检测限是多少，这种超过文献100倍的条件，不出意外应该是检测条件不同引起的（特别是流动相与荧光结合试剂不同） |
5楼2009-12-23 16:51:51