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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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thunderay

铁杆木虫 (小有名气)

[交流] 【求助】关于FLD检测器的影响因素

最近刚刚开始接触FLD,因为正好需要用FLD来做一个大鼠的血浆样品分析,这周先用溶液试了一下,发现到100ng/ml的时候就很那检测出来,想请教一下熟悉FLD检测器的战友,一般流动相中的什么部分容易对检测信号造成影响呢?我用的乙酸铵和乙腈的流动相,也有人推荐水相为乙酸或者磷酸,这些有什么影响呢?我用的检测波长是230~280
传说FLD可以做到0.1ng,也有不少paper的LLOQ达到1ng/ml,发现好难好难。。。
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y_0622

金虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
狼狼晴空(金币+2,VIP+0):感谢交流 12-23 20:22
472514568(金币+1,VIP+0):谢谢回帖! 12-23 21:58
thunderay(金币+5,VIP+0): 12-23 22:01
我的感觉:使用荧光或者电化学要求试剂纯度比较重要,血样本身样本基线就不易稳定,这与提取方法有很大关系,如果直接溶剂溶解离心进样往往干扰很多,这时候最好提取一下,至于为什么别人的文献检测灵敏度那么高,而你的很低,排除其他因素,估计是与试剂、仪器有关,在泵与检测器、试剂方面确实国外的比较好,信噪比如果按3/1算的话,看看你的最低检测限是多少,这种超过文献100倍的条件,不出意外应该是检测条件不同引起的(特别是流动相与荧光结合试剂不同)
5楼2009-12-23 16:51:51
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tianxue.1202

银虫 (小有名气)


狼狼晴空(金币+1,VIP+0):多谢交流 12-23 20:22
我们用的是乙腈的,楼主可以到网上搜看看啊,应该会有收获的
2楼2009-12-23 12:28:47
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ddw888

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
狼狼晴空(金币+2,VIP+0):感谢交流 12-23 20:22
thunderay(金币+3,VIP+0): 12-23 22:02
1.你的样品本身荧光强吗,谁说荧光灵敏度一定高。
2.波长有无扫描
3.注意流动相对荧光造成淬灭,但通常情况不会
4.pH的影响较大
3楼2009-12-23 13:55:53
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thunderay

铁杆木虫 (小有名气)

样品有荧光吸收的,不少文献报道也是用的荧光,是不是因为220到280的波长太短导致基线容易不平?发现跑很久也跑不平啊。。。
因为有相关参考文献(SCI)做到1ng/ml,但是我100ng做起来也很困难,主要是基线不平。。。波动在0.3-0.7LU之间。。。感觉实在太大了。。。
4楼2009-12-23 15:28:07
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