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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 【求助】关于FLD检测器的影响因素
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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thunderay

铁杆木虫 (小有名气)

[交流] 【求助】关于FLD检测器的影响因素

最近刚刚开始接触FLD，因为正好需要用FLD来做一个大鼠的血浆样品分析，这周先用溶液试了一下，发现到100ng/ml的时候就很那检测出来，想请教一下熟悉FLD检测器的战友，一般流动相中的什么部分容易对检测信号造成影响呢？我用的乙酸铵和乙腈的流动相，也有人推荐水相为乙酸或者磷酸，这些有什么影响呢？我用的检测波长是230~280
传说FLD可以做到0.1ng，也有不少paper的LLOQ达到1ng/ml，发现好难好难。。。
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1楼 2009-12-23 09:33:09
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y_0622

金虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★
thunderay(金币+5,VIP+0): 12-25 14:22
引用回帖:
Originally posted by thunderay at 2009-12-23 21:05:


呃，可否详细说一下这句话的意思？检测条件基本设置的是一样的啊，没有用到荧光结合试剂。。。

不过我发现一个问题，会不会可能是因为220nm，280nm的波长容易引起基线噪音过大？因为我尝试了一下流动相即时 ...

检测条件一样，而检测效果不一样，可能该色谱没做过普适实验，怀疑该色谱条件室间差异较大，首先确定下泵、柱子、检测器、流动相条件是否与文献色谱条件一致（最好厂家一致），其次如果怀疑流动相干扰，换进口试剂比较一下，没有别的方法，只有一步一步排除，做过几个荧光方面的检测，从没出现检测限差距这么大、基线跑不稳的情况，倒是电化学有这种情况。另外如果不影响实验，调低灵敏度能使基线变平。

[ Last edited by y_0622 on 2009-12-30 at 09:03 ]
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7楼2009-12-25 09:36:39
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tianxue.1202

银虫 (小有名气)
★
狼狼晴空(金币+1,VIP+0):多谢交流 12-23 20:22
我们用的是乙腈的，楼主可以到网上搜看看啊，应该会有收获的
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2楼2009-12-23 12:28:47
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ddw888

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
狼狼晴空(金币+2,VIP+0):感谢交流 12-23 20:22
thunderay(金币+3,VIP+0): 12-23 22:02
1.你的样品本身荧光强吗，谁说荧光灵敏度一定高。
2.波长有无扫描
3.注意流动相对荧光造成淬灭，但通常情况不会
4.pH的影响较大
赞一下(13人) 回复此楼
3楼2009-12-23 13:55:53
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thunderay

铁杆木虫 (小有名气)
样品有荧光吸收的，不少文献报道也是用的荧光，是不是因为220到280的波长太短导致基线容易不平？发现跑很久也跑不平啊。。。
因为有相关参考文献(SCI)做到1ng/ml，但是我100ng做起来也很困难，主要是基线不平。。。波动在0.3-0.7LU之间。。。感觉实在太大了。。。
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4楼2009-12-23 15:28:07
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