| 查看: 918 | 回复: 15 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
runxiaoli木虫 (正式写手)
|
[交流]
【求助/交流】关于3'RACE的很奇怪的现象，求助大家乐
|
||
|
各位同仁： 你们好。 最近我在做3‘race。可是遇到的问题让我觉得很奇怪。 我已经拿到了中间片段，设计了4个上游引物来进行pcr，都跑出带了，送出去测序，也都扩到了polyA，可是blast还不是我要的基因。我想问一下这是什么原因。是不是和我换了模板有关系，第一次做的时候，用的是SA处理后的模板，第二次用的则是NACL处理的，但是做中间片段的时候，跑出的带是一致的。 很奇怪出现这个问题，不知道各位同仁有什么好的建议没有。 希望大家给我出谋划策，不胜感激。 祝大家快乐，身体健康，一切顺利。  |
回复此楼» 猜你喜欢
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有262人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
-
申博自荐
已经有0人回复
hugang2004_2000
木虫 (正式写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 2022
- 散金: 325
- 红花: 2
- 帖子: 671
- 在线: 201.5小时
- 虫号: 263575
- 注册: 2006-07-02
- 性别: GG
- 专业: 植物学
★ ★ ★
runxiaoli(金币+2,VIP+0):非常感谢 12-15 11:40
runxiaoli(金币+1,VIP+0): 12-15 11:40
runxiaoli(金币+2,VIP+0):非常感谢 12-15 11:40
runxiaoli(金币+1,VIP+0): 12-15 11:40
| 我觉得，既然你可以扩增出来其他基因的Poly A，而且你的中间片段也是从这个cDNA中扩增出来的，所以，你的cDNA应该是可以用的，没有必要再重新合成cDNA,毕竟试剂盒价格也是很可观的。19个碱基是可以进行pcr，但是在race里还是太短了，如果重新设计引物，增加引物长度，先设计两个引物就可以了，分别跟接头引物1，2做1st， 2edPCR，我觉得看那时候的结果如何吧，结果不好了也不用着急着和成新cDNA，再找找原因看。那个blast看特异性的方法很简单，把你的引物序列（每次一个）放到blastx就行了，看看检索出来的结果里有没有你要的基因，既然你扩增出来了其他基因，那么可能这些其他基因是在你的blastx结果里的。呵呵 |
11楼2009-12-15 11:23:09
runxiaoli
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1832.1
- 散金: 1035
- 红花: 2
- 帖子: 301
- 在线: 260.8小时
- 虫号: 708185
- 注册: 2009-02-25
- 专业: 果树学
2楼2009-12-14 21:16:28
won7
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 954
- 散金: 55
- 帖子: 297
- 在线: 61.2小时
- 虫号: 19911
- 注册: 2003-07-30
- 性别: GG
- 专业: 水产资源与保护学
3楼2009-12-14 22:15:51
hugang2004_2000
木虫 (正式写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 2022
- 散金: 325
- 红花: 2
- 帖子: 671
- 在线: 201.5小时
- 虫号: 263575
- 注册: 2006-07-02
- 性别: GG
- 专业: 植物学
4楼2009-12-14 22:54:00
