24小时热门版块排行榜    

查看: 1712  |  回复: 20
当前主题已经存档。

随游

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】请大家帮忙:染菌(找到原因了,谢谢)


最近做实验总染菌,两次了,每次的量都很大,实在不知道怎么办了

下面是一些具体的做法,请大家帮忙看看,

碳源装在摇瓶中单独灭菌,氮源也单独灭菌,中间还有一种添加物,需要过滤灭菌,我用的是0.22um滤膜和直径50mm的滤器,过滤后再和碳氮源混合添加进去,之后再把菌丝体接进去......

PS:第一次的时候由于过滤,滤膜漏了所以染菌了,这次滤膜没有问题的,可还是染了,一百多瓶只有三十多没有染
实在不知道问题出在哪里了
(以上操作都是在工作台内进行的,都灭过菌,包括手也用酒精灭过的,哦,还有点疑问就是,如果过滤除菌哪有问题,为什么还有一部分没染菌呢?)
请大家帮帮我



------------------------------------------------------------------------------------------------------
谢谢大家了,按照大家的建议我用排除法找到了染菌的原因,是过滤除菌出问题了

[ Last edited by 随游 on 2010-1-4 at 12:47 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hhaidong

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
随游(金币+2,VIP+0):好的,谢谢,我试试 12-13 12:21
随游(金币+2,VIP+0): 12-13 12:25
过程比较复杂!排除法,取每一步处理完的液体涂平板,观察是否染菌;估计最可能染菌的操作还是过滤。
2楼2009-12-13 12:11:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xingrl

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
随游(金币+2,VIP+0): 12-13 12:25
amisking(金币+1,VIP+0): 12-15 08:14
滤膜和滤器及盛装添加物的容器也严格灭菌了吧。
操作过程中手要消毒
3楼2009-12-13 12:22:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

随游

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by xingrl at 2009-12-13 12:22:
滤膜和滤器及盛装添加物的容器也严格灭菌了吧。
操作过程中手要消毒

恩,都灭过菌了的
滤膜是放在滤器中灭的,用来装灭菌后溶液的空瓶子液灭过菌的
4楼2009-12-13 12:27:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

杨大妞

新虫 (小有名气)

★ ★
随游(金币+1,VIP+0):恩 是的哦 都是严格灭菌 超净工作台里进行的 12-13 13:49
amisking(金币+1,VIP+0): 12-15 08:14
这些操作要在通风橱里面操作的,在操作之前要打开紫外灭菌一会,再操作的,手也要灭菌
5楼2009-12-13 13:40:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hjd_2358

木虫 (小有名气)

★ ★
随游(金币+1,VIP+0):用的是移液管...... 12-14 12:54
amisking(金币+1,VIP+0): 12-15 08:14
想问问你是用枪还是移液管呢?我曾经也出现过这种情况后来发现是由于枪的原因。移液管相对枪来说更可靠。
6楼2009-12-14 08:59:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhang6871

银虫 (正式写手)

★ ★
随游(金币+1,VIP+0):应该不是操作熟练程度吧,已经做了一段时间了,之前也没染过...... 12-14 12:56
amisking(金币+1,VIP+0): 12-15 08:14
想你这种情况的话,如果能够保证所有器具完好灭菌的话,那就应该是操作的问题。操作不熟练,等操作熟练以后就应该不会染菌了。
过于功利,浮躁,布满灰尘的心都是创新的杀手!多记,心静,多动手,贴近大自然!
7楼2009-12-14 09:37:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈思容

铜虫 (正式写手)

★ ★ ★
随游(金币+1,VIP+0):碳源中的葡萄糖会和氮源反应的,如果一起高温灭菌的话 12-14 12:57
amisking(金币+2,VIP+0): 12-15 08:14
为什么C、N不放在一起灭呢,步骤多,灭菌的可能性就高
8楼2009-12-14 10:44:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

4021435281516

木虫 (小有名气)

★ ★
随游(金币+1,VIP+0):碳源还原性的糖会和氮源反应的...... 12-14 12:57
amisking(金币+1,VIP+0): 12-15 08:13
为什么不把C,N源和其他能放在一起的一起灭菌呢?
减少灭菌环节应该会大大减少染菌的几率!
9楼2009-12-14 12:46:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

flzt2009

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
随游(金币+2,VIP+0):我也怀疑菌种问题,但又有没染的;氮源就是酵母浸粉;过滤的时候压力一直有的 12-14 17:31
amisking(金币+1,VIP+0): 12-15 08:13
原因分析:菌种是否污染;N源中是否有黄豆饼粉等固形物未完全用水泡透,导致灭菌不彻底;无菌过滤器滤膜破损或在过滤时因压力太大破损;操作问题
10楼2009-12-14 16:24:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 随游 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +12 archvillain 2026-08-15 23/1150 2026-08-15 20:47 by foyo404
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
请填处理意见