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siren1214

新虫 (初入文坛)

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★
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挂柱多挂几次，我一般都是把过下来的液体再吸起来再过一次，如此反复几次。

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21楼2009-12-14 11:24:02

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hooter86

金虫 (小有名气)

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★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

现在的天气冷，温度低，有些溶液内的溶质都结晶析出了。建议在用溶液前先用水浴加热下。

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22楼2009-12-14 15:11:43

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lfgc8505

金虫 (小有名气)

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这个问题我们也想过了，也试过了，但是还是不行！

引用回帖:

Originally posted by hooter86 at 2009-12-14 15:11:
现在的天气冷，温度低，有些溶液内的溶质都结晶析出了。建议在用溶液前先用水浴加热下。

这个问题我们也想过了，也试过了，但是还是不行！
不过还是谢谢你的建议！

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23楼2009-12-15 23:46:28

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cll1024

银虫 (小有名气)

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lstt09nk(金币+2):感谢交流~~ 2010-05-21 20:04:14

胶回收中需要注意几点：
1.切胶时尽量切除不含目的片段的多余胶块，每管胶块最好不多余400mg;
2.溶胶一定要彻底，可以适当延长溶胶的时间；
3.洗脱液的加入量可以根据你PCR产物的浓度进行调整，如果觉得PCR产物浓度不大，可以适当减少洗脱液的加入量；
4.PCR产物可以同时多扩增几管，切胶后的分别溶胶，几管溶胶液同时过同一个柱子，可以提高回收产物的浓度。

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24楼2009-12-16 16:37:14

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lfgc8505

金虫 (小有名气)

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是啊，这些我也注意了，而且我的条带很亮的。

引用回帖:

Originally posted by cll1024 at 2009-12-16 16:37:
胶回收中需要注意几点：
1.切胶时尽量切除不含目的片段的多余胶块，每管胶块最好不多余400mg;
2.溶胶一定要彻底，可以适当延长溶胶的时间；
3.洗脱液的加入量可以根据你PCR产物的浓度进行调整，如果觉得PCR产物 ...

是啊，这些我也注意了，而且我的条带很亮的。
不过还是谢谢你的建议，谢谢~

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25楼2009-12-16 20:46:08

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anyanqiu

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★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

可以把回收的各种溶液40度左右的水温一下，再者，溶完胶后加入一定量的异丙醇，效果比较好。

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26楼2009-12-17 10:15:33

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neon_alone

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★ ★ ★
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lstt09nk(金币+2):欢迎多多交流~~ 2010-05-21 20:04:59

我最近也在做，效果还不错啊。
我们用的也是天根的试剂盒，我建议你1.溶胶后的温度
2.还有漂洗后，空离心2min,之后最好在超净台将管开口横放吹个15分钟左右，要让乙醇挥干。
3.而且试剂盒上写的步骤，比如胶的吸附，漂洗，洗脱，最好放5min再离心，不要立刻离心，效果会好些吧。
4.问下你最后浓度是多少，其实一般20ug/ml就可以了

希望实验顺利！

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27楼2009-12-17 19:58:18

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lfgc8505

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你说的这些我基本也都注意到了，

引用回帖:

Originally posted by neon_alone at 2009-12-17 19:58:
我最近也在做，效果还不错啊。
我们用的也是天根的试剂盒，我建议你1.溶胶后的温度
2.还有漂洗后，空离心2min,之后最好在超净台将管开口横放吹个15分钟左右，要让乙醇挥干。
3.而且试剂盒上写的步骤，比如胶的 ...

你说的这些我基本也都注意到了，但是效果还是不理想，浓度一般都是5、6纳克，而且260/280值都很大，远大于2.

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28楼2009-12-17 23:08:15

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