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xiaotian1086

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】纯化mRNA,大家给点建议

大家好,最近用QIAGEN的试剂盒纯化mRNA,跑胶后总会出现相对较亮的28s和18s带,不知道是哪一步做的不充分。我用的是mini kit,起始总RNA为250微克,中间都是按照步骤做的。折腾了好长时间了,总RNA都快用完了,虫友们给点建议吧,谢谢了
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duke-007

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这个问题还是需要想想的,是不是应该换一种凝胶呢?
2楼2009-12-10 17:25:14
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ytfly128

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这个问题我真不懂,随便说点吧,哈哈
3楼2009-12-10 17:27:52
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xiaotian1086

金虫 (小有名气)

什么凝胶啊
4楼2009-12-10 22:42:20
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liyong1981

金虫 (正式写手)


1.天根的试剂盒不推荐
2.换种胶试试,比如MOPS变性胶
3,mRNA本来就含量很低,其他的比例很高,我觉得你可以降低纯化的量,看能不能降低干扰
5楼2009-12-11 15:20:46
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genomelin

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
推荐你用两遍纯化,效果很好,电泳时流出液也要上样
如果你做RNA-seq ,推荐用Dynal beads(oligoT),其他的实验这两个都可以
6楼2009-12-11 19:17:16
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