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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】纯化mRNA,大家给点建议
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xiaotian1086

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】纯化mRNA,大家给点建议

大家好，最近用QIAGEN的试剂盒纯化mRNA，跑胶后总会出现相对较亮的28s和18s带，不知道是哪一步做的不充分。我用的是mini kit，起始总RNA为250微克，中间都是按照步骤做的。折腾了好长时间了，总RNA都快用完了，虫友们给点建议吧，谢谢了
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1楼 2009-12-10 16:38:49
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duke-007

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这个问题还是需要想想的，是不是应该换一种凝胶呢？
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2楼2009-12-10 17:25:14
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ytfly128

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这个问题我真不懂，随便说点吧，哈哈
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3楼2009-12-10 17:27:52
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xiaotian1086

金虫 (小有名气)
什么凝胶啊
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4楼2009-12-10 22:42:20
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liyong1981

金虫 (正式写手)
1.天根的试剂盒不推荐
2.换种胶试试，比如MOPS变性胶
3，mRNA本来就含量很低，其他的比例很高，我觉得你可以降低纯化的量，看能不能降低干扰
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5楼2009-12-11 15:20:46
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genomelin

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
推荐你用两遍纯化，效果很好，电泳时流出液也要上样
如果你做RNA-seq ，推荐用Dynal beads（oligoT），其他的实验这两个都可以
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6楼2009-12-11 19:17:16
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