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sirius8528

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】HPLC遇到的怪现象,求教

用HPLC测酚类的含量
流动相甲醇80,水20,流速1mL/min,波长254nm
结果所有的峰都在4min出现,而且标样和样品峰高差不多,没有减少的迹象。
而实际上观察到样品中的酚已经被氧化生成沉淀了。
这到底是怎么一回事?有明白人能给分析一下吗?
测试的酚有苯酚,对氯酚,间氨基酚,2-甲氧基酚,4-甲氧基酚,邻苯二酚等。
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
opq691(金币+1,VIP+0):谢谢 12-1 18:01
ludasheng-1(金币+1,VIP+0): 12-1 18:42
甲醇比例太大了,楼主先用梯度洗脱来摸一下比例吧
中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
2楼2009-12-01 15:33:10
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sirius8528

木虫 (正式写手)

happy169(金币+0,VIP+0):流动相配比是否正确?考虑下所用试剂是否有变化!测试条件是否有不同 12-2 13:09
引用回帖:
Originally posted by akosrios at 2009-12-1 15:33:
甲醇比例太大了,楼主先用梯度洗脱来摸一下比例吧

以前用这个比例做出来过。
3楼2009-12-01 15:35:56
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luomuwuhen

金虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
opq691(金币+2,VIP+0):谢谢 12-1 18:01
把甲醇比例调小些看看是不是还这么快洗脱出来不就结了,全都在4分钟出峰,只能说明你的样品中各成分极性都很强,试试其他比例吧,比如甲醇-水(50:50)
药物合成
4楼2009-12-01 15:53:39
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sirius8528

木虫 (正式写手)


opq691(金币+1,VIP+0):交流奖励 12-1 18:02
引用回帖:
Originally posted by luomuwuhen at 2009-12-1 15:53:
把甲醇比例调小些看看是不是还这么快洗脱出来不就结了,全都在4分钟出峰,只能说明你的样品中各成分极性都很强,试试其他比例吧,比如甲醇-水(50:50)

之前我用这个比例做过,苯酚8min,间氨基酚2min,唯一的不同是之前用的是水溶液,现在用氯仿溶液,其他比例也换过,可样品比标样还高或者一样是怎么回事?
5楼2009-12-01 16:07:19
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zhongweixu

铁杆木虫 (著名写手)


opq691(金币+1,VIP+0):thanks 12-1 18:02
建议换根柱试试看
6楼2009-12-01 17:25:21
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ysy2008

金虫 (小有名气)

★ ★
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chiraler(金币+1,VIP+0):谢谢回帖交流 12-2 00:32
建议你再用水溶液做做看,氯仿与水不混溶,是不是会有影响
7楼2009-12-01 23:10:53
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yxh1875

银虫 (正式写手)

★ ★
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chiraler(金币+1,VIP+0):谢谢回帖交流 12-2 00:32
氯仿一般用在正相色谱中,甲醇是用在反相色谱中,对于反相色谱,氯仿的对填料的溶解太厉害了,会损坏色谱柱,所以可能是你的色谱柱填料被溶解了,基本没有保留了。
8楼2009-12-01 23:20:40
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hcj000

新虫 (小有名气)

★ ★
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opq691(金币+1,VIP+0):感谢参与交流,欢迎来分析版交流,也希望去专家版交流 12-6 14:33
lz你用什么色谱柱子呢?估计用的柱子有关系。
9楼2009-12-02 10:17:21
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sirius8528

木虫 (正式写手)

opq691(金币+0,VIP+0):欢迎来分析版交流,如果还有问题也希望去专家版交流 12-6 14:33
引用回帖:
Originally posted by hcj000 at 2009-12-2 10:17:
lz你用什么色谱柱子呢?估计用的柱子有关系。

C18柱
10楼2009-12-04 21:35:01
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