应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PCR扩增
51/1返回列表
查看: 459  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

hyw0794

木虫 (正式写手)

[交流] PCR扩增

请各位帮忙分析一下，采用哪种PCR进行扩增霉菌的DNA，如果用你的方法，我PCR出正确条带，再送20个金币。谢谢！
我用18SPCR做，没有条带。反应体系是18SPCR反应体系            
ddH2O          18.8 ul　，10×load buffer   2.5 ul，
    dNTP              ２ ul，18SPF1          0.25 ul，18SPR          0.25 ul，
     LATaq酶         0.2 ul ， 模版            1 ul ，　总体积              25ul。
程序 95℃    8min；94℃    30sec，55℃     30sec，72℃     4min  30个循环；72℃     8min。
引物18SPF1：AGTAGTCATATGCTTGTCTC
18SPF2：TCTCAAAGATTAAGCCATGC
18SPR： TAATGATCCTTCCGCAGGTT
菌落图片传不上来。如果要看图片的话，我的ｑｑ是752409857，请与我联系。我把图片传给您。如果可行的话，另外再送10个金币。

[ Last edited by amisking on 2009-11-14 at 13:27 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-11-14 12:13:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyw0794

木虫 (正式写手)
补充说明，我用的是公司加好镁离子的10×load buffer，谢谢各位积极回帖，有奖哦。
赞一下 回复此楼
3楼2009-11-14 12:47:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

j2

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
没错过霉菌的，不过pcr体系受镁离子量影响
赞一下(1人) 回复此楼
修炼ｉｎｇ，当虫仙……
2楼2009-11-14 12:39:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

六妖妖

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这个跟反应体系不是很大关系吧。你的模板有没有降解啊
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2009-11-14 22:43:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
用这个程序跑跑看，模板做几个梯度，不稀释做个，稀释十倍做个，20倍做个。
95℃    5 min；

94℃    30 sec，
65℃     30 sec，
72℃     2 min  
15个循环；（每循环一次，退火温度降低1 ℃，直到退火温度降到50 ℃）

94℃    30 sec，
50℃     30 sec，
72℃     2 min  
15-20个循环；

72℃     10 min
4℃ forever
赞一下(1人) 回复此楼
Thank-you，so-blue.
5楼2009-11-15 11:09:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿0703化学招61最终排名62化学求调剂 +29 招61排名62 2026-04-07 33/1650 2026-04-13 10:16 by sxdj2
[考研] 268分085602化学工程调剂 +31 月照花林。 2026-04-09 31/1550 2026-04-12 23:37 by 学zh
[考研] 307求调剂 +10 tzq94092 2026-04-10 10/500 2026-04-12 08:18 by wise999
[考研] 327求调剂 +5 拾光任染 2026-04-06 5/250 2026-04-12 02:29 by 秋豆菜芽
[考研] 求调剂，一志愿大连理工大学354分 +5 雨声余生 2026-04-11 6/300 2026-04-11 16:12 by 雨声余生
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +16 叶zilin 2026-04-10 16/800 2026-04-11 11:04 by may_新宇
[考研] 0854调剂 +8 950824he@ 2026-04-09 8/400 2026-04-11 10:11 by zhq0425
[考研] 22408调剂求助 +7 毂12 2026-04-09 9/450 2026-04-11 09:23 by 哦哦123
[考研] 314求调剂 +18 xhhdjdjsjks 2026-04-09 19/950 2026-04-10 18:53 by HPUCZ
[考研] 085601初试330分找调剂 +10 流心奶黄包l 2026-04-09 10/500 2026-04-10 08:14 by Sammy2
[考研] 已调剂 +18 柴郡猫_ 2026-04-09 19/950 2026-04-09 22:10 by 柴郡猫_
[考研] 085400电子信息类（川大控制工程）求调剂可跨专业 求老师联系 +3 626776879 2026-04-08 3/150 2026-04-09 16:05 by 猪会飞
[考研] 机械专硕273请求调剂 +6 庚申壬申 2026-04-07 6/300 2026-04-08 22:41 by bljnqdcc
[考研] 考研求调剂 +4 雯??? 2026-04-08 4/200 2026-04-08 21:44 by 土木硕士招生
[考研] 0703化学调剂 348分 +14 唉我超真没招了 2026-04-06 15/750 2026-04-08 19:16 by 我减肥1
[考研] 275 求调剂 +8 Lei812514 2026-04-07 8/400 2026-04-08 12:46 by chemisry
[考研] 338求调剂 +8 wxygxsaaaaa 2026-04-06 8/400 2026-04-08 06:58 by 无际的草原
[考研] 313求调剂 +3 十六拾陆 2026-04-07 3/150 2026-04-07 23:20 by lbsjt
[考研] 专硕085403，291分，有两篇专利，一国一奖 +3 哈吉咪哈吉咪 2026-04-07 3/150 2026-04-07 18:21 by 蓝云思雨
[考研] 材料调剂 +17 小刘同学吖吖 2026-04-06 18/900 2026-04-07 11:41 by 诗与自由
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭