| 查看: 692 | 回复: 5 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 ziyinger 的 8 个金币 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
关于做DGGE遇到的问题，费解！！！ 已有1人参与
|
|||
|
最近一直在做DGGE的实验，从前期的提DNA开始，一直在摸索中前进，但是这一个月来，我的实验到了一个瓶颈期，一直找不到原因，在这里跟大家交流一下，看能不能找到时什么原因 1.PCR的结果经过琼脂糖电泳检验，有条带，经优化后条带比较单一； 2.去跑聚丙烯酰胺电泳的时候，出来的一直是这样的胶：只有胶孔处有条亮带，底下的胶是一整片的，什么条带都没有，甚至没有泳道； 3.我拿师兄已经跑过DGGE的pcr结果去跑，还是一样的结果，开始怀疑是药品的问题 4.让四楼师姐做DGGE的时候给带个样，我的pcr结果可以出来条带，还不错； 4用四楼师姐的全套药品，包括她已经配好的胶，刚用过一次（可以做出来）来做DGGE，加了我的pcr结果和师姐已经跑过DGGE剩下的PCR样品一起来做，出来的结果仍然是胶孔处有一亮带，底下的连泳道都没有，跟别说条带了，在这次实验的过程中，师姐一直在旁边指导我的操作，而且仪器师姐两天天刚用过，没问题。 做DGGE差不错一个多月了，前期以为是自己的操作，或者说是条件没有优化好，但做到后来发现不管我怎么优化实验条件，都是一样的结果（只有胶孔有亮带，底下连泳道都没有），但做完第四步骤后确实很受打击，突然发现失去了前进的方向，面对这样的结果不知道从何入手。 本来想放个图片上来的，但好像不太会，就不放上来了。 有做个DGGE的师兄师姐们，能给提点意见，说说自己的想法就最好了，先谢谢大家了。 这两天一直在思考是哪儿出问题了，现在能想到的是电泳是不是根本没跑起来，不然怎么会不往下跑呢，但是pump开了，电压从70V到120V都试过，应该是没有问题的，真的不知道是哪儿出问题了。 [ Last edited by amisking on 2010-4-18 at 21:50 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有131人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
5楼2010-02-08 01:34:38
2楼2009-11-13 12:16:25
3楼2009-11-13 14:17:36
shirongjiu
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 贵宾: 0.227
- 金币: 1652.8
- 散金: 84
- 红花: 4
- 帖子: 523
- 在线: 224.1小时
- 虫号: 727330
- 注册: 2009-03-20
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
good luck
★
ziyinger(金币+1,VIP+0): 11-13 16:43
ziyinger(金币+1,VIP+0): 11-13 16:43
|
my suggestion: 1) check the TAE buffer, is it fresh or not? 2) the electric circute is working well?, I mean the voltage is ok, but the current may not available due to the improper connection. 3) call the technician of the DGGE supplier for solutions 4) refer to the using manual of DGGE for possible answers. |
4楼2009-11-13 16:36:26
