应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 做定量PCR为什么要提RNA而不是DNA
51/1返回列表
查看: 1531  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

jjmm2009

[交流] 做定量PCR为什么要提RNA而不是DNA

有个很菜鸟的问题，定量也做了很久了，突然想到一个问题，为什么做定量PCR的时候要提取样本的RNA而不是DNA呢，请各位高手不吝赐教，非常感谢

还有一个，设计荧光定量PCR引物的时候我们都是跨内含子的，主要是怕DNA污染，那如果我的RNA提取之后用DNase I 处理过了，引物设计还一定要跨内含子吗？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-11-12 20:11:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mcl49510

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
定量PCR是检测表达程度的技术，可以直观的检测出一个基因在感兴趣的部位有无表达，表达的强度，要是抽提DNA则不能检测，因为DNA在所有的组织中都存在，是不能反映所研究的问题的，
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2009-11-14 10:03:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

iaminxanadu

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
一般作定量PCR的目的是看不同时间空间某个基因“活动”，一般而言就是在一个内参下看某种mRNA的丰度，所以。。。。

也可以用DNA，一般来做基因拷贝数的估算
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2009-11-12 20:53:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Entrez1110

定量PCR一般对某基因的mRNA表达水平定量，因为mRNA是合成蛋白的模板，蛋白质是机体生命活动执行者。基因组没有定量的意义（目前想不出有啥意义）。

跨内含子确实是防止DNA污染，虽说DNaseI可以去除DNA，但也不是100%的，加多一道防锁总没错，况且DNaseI去除DNA过程也存在人为因素，会损耗一些RNA。
赞一下 回复此楼
3楼2009-11-12 20:59:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Entrez1110

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
基因拷贝数用这种方法去判断？请高手赐教！
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2009-11-12 21:02:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +4 majunge000 2026-08-11 6/300 2026-08-13 16:50 by 四季常青藤
[基金申请] filecode +14 documentary 2026-08-10 16/800 2026-08-13 16:39 by 润生71
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 11/550 2026-08-13 10:40 by ZH远山
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 36/1800 2026-08-12 22:50 by sdfapple719
[论文投稿] 职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭