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请教关于包涵体蛋白纯化的问题
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最近在纯化一个原核表达的蛋白,但出现了一点问题,想请教一下: 蛋白是包涵体形式的,前面通过6M的盐酸胍溶液已经溶解了,然后用400mM的L-Arg HCl溶液+5mM的GSH和0.5mM的GSSG复性buffer进行了复性,用超滤管浓缩的时候浓缩的就特别慢,上分子筛前高速离心发现有很多沉淀。检测了一下蛋白都在沉淀里,上清里没有目的蛋白了,请问要怎么调整呢?可能是哪里出了问题呢? ![]() 谢谢大家指点了!!! |
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