24小时热门版块排行榜    

查看: 3005  |  回复: 9
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 丰度Bio君 的 1 个金币 ,回帖就立即获得 1 个金币,每人有 1 次机会

丰度Bio君

新虫 (小有名气)


[交流] α-银环蛇毒素的合成与表达、相关研究案例

1. 合成与表达

◦ 化学合成:化学合成 α- 银环蛇毒素具有挑战性,但它允许方便地插入非天然氨基酸或新的化学功能。有研究报道了一种化学合成荧光标记的 α- 银环蛇毒素的方法,通过将全长肽设计为在氨基末端包含一个炔基功能,然后通过三步连续的基于酰肼的肽片段偶联反应合成 α- 银环蛇毒素。在完成氧化折叠后,通过点击化学将叠氮修饰的 Cy5 荧光团偶联到毒素上。还有研究报道了一种结合 Fmoc - SPPS 和基于肽酰肼的连接策略合成 α - 银环蛇毒素的新方法,该两段连接方法可实现 α - 银环蛇毒素类似物的高效合成。

◦ 基因克隆与表达:利用 SMART 技术反转录合成银环蛇毒腺 cDNA,可克隆并测定 α- 银环蛇毒素基因。研究人员曾得到 14 种 mRNA 序列,并将其中一种新的 α- 银环蛇毒素基因亚克隆到原核表达载体 pQE30a 和 pGEX - 4T - 1 中,在大肠杆菌中通过 IPTG 诱导表达。其中带有 GST 融合蛋白的重组质粒 α - BgTX (P22 - A31)/pGEX - 4T - 1 在 BL21 菌株中得到高效表达,表达量占菌总蛋白的 30%,可溶形式存在的融合蛋白大于 25% 。也有研究设计并人工合成引物,对重组质粒 pMD - α - BGT 进行 PCR 扩增获得 α - BGT 基因,构建融合基因表达载体 pGEX - α - BGT,转化大肠杆菌 BL21 (DE3) 进行 IPTG 诱导表达,表达产物经分析在约 34 ku 处可见明显的外源蛋白质表达带,表达量约占细菌总蛋白的 32.6%,且融合表达蛋白与天然 α - BGT 标准品具有相似的抗原性。

2. 相关研究案例

◦ 在细胞研究中的应用:有研究通过自动膜片钳记录,证实了荧光合成的 α- 银环蛇毒素对烟碱型受体具有预期的纳摩尔亲和力,并且该荧光标记的 α- 银环蛇毒素可被模拟 α- 银环蛇毒素结合位点的 20 聚体肽取代,同时通过共聚焦显微镜观察到 TE671 细胞可以被荧光毒素标记,且这种标记可被 20 聚体竞争肽部分取代,表明合成的荧光标记 α- 银环蛇毒素保留了与肌肉烟碱型受体结合的优良特性。

动物实验中的应用:在观察电针足三里对术后大鼠腹腔粘连组织血管内皮生长因子(VEGF)表达影响的实验中,造模后注射 α- 银环蛇毒素作为实验分组之一,用于探讨电针足三里发挥抗炎作用的机制。实验结果表明阻断胆碱能受体 α7 亚基后施行电针足三里,组织 VEGF 表达无明显降低,提示其发挥抗炎机制与胆碱能抗炎通路有关。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
nono20092楼
2025-06-19 14:32   回复  
丰度Bio君(金币+1): 谢谢参与
·
2025-06-19 15:44   回复  
丰度Bio君(金币+1): 谢谢参与
2025-06-19 20:56   回复  
丰度Bio君(金币+1): 谢谢参与
psylhh5楼
2025-06-19 21:55   回复  
丰度Bio君(金币+1): 谢谢参与
2025-06-20 08:26   回复  
丰度Bio君(金币+1): 谢谢参与
tfang7楼
2025-06-20 13:08   回复  
丰度Bio君(金币+1): 谢谢参与
linzhiabc8楼
2025-06-22 06:52   回复  
丰度Bio君(金币+1): 谢谢参与
XG-WUST9楼
2025-06-22 20:36   回复  
丰度Bio君(金币+1): 谢谢参与
up 发自小木虫IOS客户端
tzynew10楼
2025-06-24 15:20   回复  
丰度Bio君(金币+1): 谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 丰度Bio君 的主题更新
提示: 如果您在30分钟内回复过其他散金贴,则可能无法领取此贴金币
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 324求调剂 +7 wxz2 2026-03-03 10/500 2026-03-08 12:42 by 蓝莓都给你
[考研] A区一本交叉课题组,低分调剂,招收机械电子信息通信等交叉方向 +45 lisimayy 2026-03-04 58/2900 2026-03-08 12:32 by khalilffff
[考研] 334求调剂 +3 Trying] 2026-03-07 3/150 2026-03-08 03:45 by lfhuang
[考研] 322分 085600求调剂,有互联网+国金及主持省级大创经历 +4 熊境喆 2026-03-05 4/200 2026-03-07 22:04 by 星空星月
[考研] 304求调剂 +4 52hz~~ 2026-03-05 5/250 2026-03-07 15:47 by lature00
[考研] 一志愿南京大学资源与环境专业283分求调剂 +8 追云?? 2026-03-04 8/400 2026-03-07 09:23 by 斩魂滴兔子!
[考研] 0703 东华大学 理学化学均过 a 线,总分 281 求调剂 +6 香香 Lu 2026-03-03 11/550 2026-03-06 15:37 by @飒飒飒飒
[考研] 不限学校专业的调剂同学看过来 +5 啊摆啊摆 2026-03-05 9/450 2026-03-06 12:06 by 啊摆啊摆
[考研] 085600材料与化工调剂 280分 +13 yyqqhh 2026-03-03 13/650 2026-03-06 11:29 by 2020015
[考研] 材料与化工304求调剂 +7 邱gl 2026-03-05 10/500 2026-03-06 01:11 by 卷柏卷柏
[考研] 考研282分求调剂,接受跨专业 +4 刘淄博 2026-03-04 7/350 2026-03-05 22:56 by 刘淄博
[考研] 334求调剂 +3 Trying] 2026-03-03 4/200 2026-03-05 16:39 by zhukairuo
[考研] 376求调剂 +3 王浩然sam 2026-03-04 3/150 2026-03-05 07:48 by bxbo
[考研] 一志愿武汉理工大学-085602-总分296分-求调剂 +7 紫川葡柚 2026-03-04 7/350 2026-03-04 21:04 by kakakapanpan
[考研] 0703化学求调剂,总分320分,一志愿中南民族大学 +3 19286712440 2026-03-04 3/150 2026-03-04 18:30 by houyaoxu
[考研] 求调剂 +4 熬夜的猫头鹰 2026-03-02 4/200 2026-03-04 17:22 by 梦天888
[考研] 本科太原理工采矿工程,求调剂 +3 onlx 2026-03-01 3/150 2026-03-04 15:57 by Stephen_ym
[考研] 化工270求调剂 +10 什么名字qwq 2026-03-02 10/500 2026-03-03 13:54 by NUAAZXWS
[考研] 材料工程求调剂 +3 1431251 2026-03-03 3/150 2026-03-03 11:58 by EBSD
[考研] 288求调剂 +3 少71.8 2026-03-02 5/250 2026-03-03 06:01 by tgxtgxtgx9
信息提示
请填处理意见