24小时热门版块排行榜    

查看: 713  |  回复: 6
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

minmin-911

铜虫 (小有名气)

[交流] 蓝白斑不出现

最近做蓝白斑实验,很不顺利  第一次做的时候 PCR产物没割胶回收就直接去连接
,T4连接酶连接4h 转化了 结果我的平板就长了1个白斑 经过验证 发现那个不是我的目的基因
第二次做 把PCR产物都割胶回收纯化了 然后T4连接酶连接大于4h(老板说时间长点好)难道时间长点真的好么?结果蓝白斑都没出现,不知道是哪个地方出了问题   最近很不顺  做实验做的崩溃了  希望大家帮我分析下 这个是什么问题。平板都是一起配的 肯定不是平板的问题 因为第一次长了 然后就是感受态的问题 我的感受态第一次是用的人家的 结果长的不多  第二次感受态是自己做的  结果都没长 难道感受态的问题?
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kwkw

木虫 (著名写手)

连接在4度过夜,这个可能是你的感受态有问题,你用TSS法做感受态100%成功。半年前我跟你一样,后来才知道是感受态的原因,走了很多冤枉路,郁闷啊!
再苦:也别忘记坚持!再烦:也别忘记微笑!再急:也要注意语气!再累:也要爱自己!低调做人,你会一次比一次稳健。高调做事,你会一次比一次优秀!
7楼2009-11-07 15:50:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

红多多

木虫 (正式写手)

版筑饭牛的日子

呵呵 你做实验没有阴性对照么?可以用一个已知的抗性质粒进行转换,这样可以排除是不是感受态的问题嘛,记得下次做实验做对照哦!还有连接的时候记得要使内切酶失活。不行了买试剂盒做嘛,也花不了多少钱,很方便的。
可以用QQ找我……
2楼2009-11-07 11:57:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zxx0914

金虫 (小有名气)

我每次连接都超过16h,一般一晚上,takela的载体,还行,就是有时候感受态做不好
3楼2009-11-07 12:51:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zxx0914

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
minmin-911(金币+5,VIP+0): 11-19 10:51
可能是感受态的问题,你摇菌多长时间,不要太长,要不菌活性太低,我刚开始跟你情况差不多,多做几次就好了
4楼2009-11-07 12:52:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 299求调剂 +5 某某某某位 2026-03-21 5/250 2026-03-23 23:36 by 热情沙漠
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 11/550 2026-03-23 23:29 by 呆呆师姐
[考研] 081700 调剂 267分 +7 迷人的哈哈 2026-03-23 7/350 2026-03-23 23:19 by 星空星月
[考研] 材料专业求调剂 +11 hanamiko 2026-03-18 11/550 2026-03-23 23:12 by peike
[考研] 284求调剂 +3 yanzhixue111 2026-03-23 6/300 2026-03-23 22:58 by pswait
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +5 niko- 2026-03-22 5/250 2026-03-23 22:01 by fuyu_
[考研] 0703化学求调剂 +4 奶油草莓. 2026-03-22 5/250 2026-03-23 19:37 by pswait
[考研] 一志愿中国石油大学(华东) 本科齐鲁工业大学 +4 石能伟 2026-03-17 4/200 2026-03-23 17:51 by 17862566385
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +8 困于星晨 2026-03-17 10/500 2026-03-23 13:05 by 醉在风里
[考研] 333求调剂 +6 87639 2026-03-21 10/500 2026-03-23 10:41 by Iveryant
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 0805 316求调剂 +3 大雪深藏 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:55 by 学员8dgXkO
[考研] 313求调剂 +4 肆叁贰壹22 2026-03-19 4/200 2026-03-21 17:33 by ColorlessPI
[考研] 265求调剂 +3 Jack?k?y 2026-03-17 3/150 2026-03-21 03:17 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南昌大学,327分,材料与化工085600 +9 Ncdx123456 2026-03-19 9/450 2026-03-20 23:41 by lovewei0727
[考研] 330求调剂 +4 小材化本科 2026-03-18 4/200 2026-03-20 23:13 by JourneyLucky
[考研] 一志愿苏州大学材料求调剂,总分315(英一) +5 sbdksD 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:10 by luoyongfeng
[考研] 一志愿西南交通 专硕 材料355 本科双非 求调剂 +5 西南交通专材355 2026-03-19 5/250 2026-03-20 21:10 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见