24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 727  |  回复: 6
当前主题已经存档。

minmin-911

铜虫 (小有名气)

[交流] 蓝白斑不出现

最近做蓝白斑实验,很不顺利  第一次做的时候 PCR产物没割胶回收就直接去连接
,T4连接酶连接4h 转化了 结果我的平板就长了1个白斑 经过验证 发现那个不是我的目的基因
第二次做 把PCR产物都割胶回收纯化了 然后T4连接酶连接大于4h(老板说时间长点好)难道时间长点真的好么?结果蓝白斑都没出现,不知道是哪个地方出了问题   最近很不顺  做实验做的崩溃了  希望大家帮我分析下 这个是什么问题。平板都是一起配的 肯定不是平板的问题 因为第一次长了 然后就是感受态的问题 我的感受态第一次是用的人家的 结果长的不多  第二次感受态是自己做的  结果都没长 难道感受态的问题?
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

红多多

木虫 (正式写手)

版筑饭牛的日子

呵呵 你做实验没有阴性对照么?可以用一个已知的抗性质粒进行转换,这样可以排除是不是感受态的问题嘛,记得下次做实验做对照哦!还有连接的时候记得要使内切酶失活。不行了买试剂盒做嘛,也花不了多少钱,很方便的。
可以用QQ找我……
2楼2009-11-07 11:57:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zxx0914

金虫 (小有名气)

我每次连接都超过16h,一般一晚上,takela的载体,还行,就是有时候感受态做不好
3楼2009-11-07 12:51:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zxx0914

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
minmin-911(金币+5,VIP+0): 11-19 10:51
可能是感受态的问题,你摇菌多长时间,不要太长,要不菌活性太低,我刚开始跟你情况差不多,多做几次就好了
4楼2009-11-07 12:52:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pidou213

木虫 (正式写手)

做好阴性对照;对于感受态细胞的制备上多下点功夫,我觉得这一点可能性最大。说的严重一点,你的感受态细胞或许都已经死亡了,因为篮板都没有长!!!
见得多爱的多
5楼2009-11-07 14:02:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小白3521

金虫 (小有名气)

要不就买点感受态吧,我们实验室感受态都是买的
6楼2009-11-07 14:20:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kwkw

木虫 (著名写手)

连接在4度过夜,这个可能是你的感受态有问题,你用TSS法做感受态100%成功。半年前我跟你一样,后来才知道是感受态的原因,走了很多冤枉路,郁闷啊!
再苦:也别忘记坚持!再烦:也别忘记微笑!再急:也要注意语气!再累:也要爱自己!低调做人,你会一次比一次稳健。高调做事,你会一次比一次优秀!
7楼2009-11-07 15:50:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 minmin-911 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料085601调剂 +32 何润采123 2026-04-10 34/1700 2026-04-14 08:47 by 木木mumu~
[考研] 22专硕求调剂 +8 haoyun上岸 2026-04-11 10/500 2026-04-13 22:15 by zhq0425
[考研] 274求调剂 +8 山阿蔓 2026-04-07 8/400 2026-04-13 20:32 by biomen
[基金申请] 有爆料,一个青年教师卖房得400万,然后换了一个四青帽子 +11 babu2015 2026-04-08 11/550 2026-04-13 16:33 by probebill
[考研] 一志愿西交机械专硕求调剂 +9 求上岸的小王 2026-04-10 9/450 2026-04-13 16:08 by jiangguiquan11
[考研] 求调剂,262机械专硕 +8 嗯yyl 2026-04-08 8/400 2026-04-12 02:31 by 秋豆菜芽
[考研] 调剂 +10 只叙离别辞 2026-04-09 12/600 2026-04-11 20:57 by 逆水乘风
[考研] 352 求调剂 +6 yzion 2026-04-11 8/400 2026-04-11 16:24 by 明月此时有
[考研] 调剂 +4 电气300求调剂不 2026-04-08 7/350 2026-04-11 10:44 by 紫曦紫棋
[考研] 314求调剂 +18 xhhdjdjsjks 2026-04-09 19/950 2026-04-10 18:53 by HPUCZ
[考研] 一志愿京区985,085401电子信息,本科电子信息 +3 阳光开朗的男孩 2026-04-10 3/150 2026-04-10 16:29 by sophia_93
[考研] 机械专368 有去处吗 +4 种大树 2026-04-10 4/200 2026-04-10 15:31 by jiajinhpu
[考研] 344求调剂 +7 丶风雪夜归人丶 2026-04-09 7/350 2026-04-10 12:05 by pengliang8036
[考研] 一志愿中南大学物理学,英一66,求调剂 +4 长烟旖旎 2026-04-08 5/250 2026-04-10 10:31 by 颖果儿
[考研] 青岛科技大学材料学院,环境学院调剂补录4月10日以前都可以 +3 1青科大。 2026-04-09 5/250 2026-04-10 09:58 by 翩翩一书生
[考研] 332,085601求调剂 +12 ydfyh 2026-04-09 14/700 2026-04-09 17:28 by wp06
[考研] 085400电子信息类(川大控制工程)求调剂可跨专业 求老师联系 +3 626776879 2026-04-08 3/150 2026-04-09 16:05 by 猪会飞
[考研] 招收有机化学、化工,药学,食品灯专业学生 +3 yrfhjgdj 2026-04-08 3/150 2026-04-09 10:15 by QYQX_123
[考研] 生物学328分求调剂 +9 闪电kkl 2026-04-08 10/500 2026-04-08 21:42 by liuhuiying09
[考研] 11408 325分 +3 jgtxuxgkx 2026-04-07 3/150 2026-04-07 23:10 by lbsjt
信息提示
请填处理意见