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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请各位做过SOE-PCR的各位大侠不吝赐教！！经确认将奖励50金币或更多！
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雪山飞狐7233

铁杆木虫 (著名写手)

铁杆小虫

[交流] 请各位做过SOE-PCR的各位大侠不吝赐教！！经确认将奖励50金币或更多！

本人想用SOE-PCR的方法扩增一个78bp的基因，设计了三个引物（P1、P2、P3），其中P1、P3是正常的引物，P2的3‘端与P1的3’端 互补，P2的5‘端与P3的3’端互补部分相同。我P出来的结果大小与产物相同，但是我不加P2也能P出结果来，请问这是为什么？
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梦在路就在！
1楼 2009-11-05 17:01:09
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断弦的琴

铁虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
雪山飞狐7233(金币+5,VIP+0): 11-20 14:33
我认为你说的 p1 p3扩出来的仅仅是引物二聚体。
二聚体大小是小于100bp的。
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不知道失去了多少以后我们能不再痛苦,不知道偿多少冷暖以后我们能看破生命.
8楼2009-11-10 11:00:04
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雪山飞狐7233

铁杆木虫 (著名写手)

铁杆小虫
小木虫里面没有人做这方面的吗？
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梦在路就在！
2楼2009-11-06 08:46:43
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+3,VIP+0): 11-10 11:37
雪山飞狐7233(金币+5,VIP+0): 11-20 14:32
本人有做过啊，就是overlapping PCR啊，你引物设计有问题吧，感觉你引物设计的不对，序列就只有78bp，就要做什么啊，定点突变还是缺失突变啊，78bp用不着做PCR啊，直接合成都行。

你确认只是78bp吗？

[ Last edited by gyesang on 2009-11-6 at 09:29 ]
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2009-11-06 09:16:46
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
★ ★ ★ ★ ★
雪山飞狐7233(金币+5,VIP+0): 11-20 14:33
设计SOEPCR一般是 引物 的5‘端互补，不是3’端互补啊
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
4楼2009-11-06 09:31:47
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