24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 887  |  回复: 7
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

雪山飞狐7233

铁杆木虫 (著名写手)

铁杆小虫

[交流] 请各位做过SOE-PCR的各位大侠不吝赐教!!经确认将奖励50金币或更多!

本人想用SOE-PCR的方法扩增一个78bp的基因,设计了三个引物(P1、P2、P3),其中P1、P3是正常的引物,P2的3‘端与P1的3’端 互补,P2的5‘端与P3的3’端互补部分相同。我P出来的结果大小与产物相同,但是我不加P2也能P出结果来,请问这是为什么?
回复此楼

» 猜你喜欢

梦在路就在!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

scienzyme

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+2,VIP+0): 11-10 11:37
雪山飞狐7233(金币+10,VIP+0): 11-20 14:33
你这个基因才78bp,完全可以直接合成。一般的公司对<=59bp和>=60bp的引物价格是两个档次,如果你嫌贵,可合成两条短于59bp的引物,这两条引物在3'端互补,5'端就是你的基因两端。加入PCR的原料,把这两条引物退火,即可让它们延伸为79bp的全长基因。注意,如果用Taq polymerase,则会多加一个A。
没有必要用三条引物。
5楼2009-11-06 10:31:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

雪山飞狐7233

铁杆木虫 (著名写手)

铁杆小虫

小木虫里面没有人做这方面的吗?
梦在路就在!
2楼2009-11-06 08:46:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+3,VIP+0): 11-10 11:37
雪山飞狐7233(金币+5,VIP+0): 11-20 14:32
本人有做过啊,就是overlapping PCR啊,你引物设计有问题吧,感觉你引物设计的不对,序列就只有78bp,就要做什么啊,定点突变还是缺失突变啊,78bp用不着做PCR啊,直接合成都行。

你确认只是78bp吗?

[ Last edited by gyesang on 2009-11-6 at 09:29 ]
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2009-11-06 09:16:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

★ ★ ★ ★ ★
雪山飞狐7233(金币+5,VIP+0): 11-20 14:33
设计SOEPCR一般是 引物 的5‘端互补,不是3’端互补啊
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
4楼2009-11-06 09:31:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料工程085601,270求调剂 +42 @ASDF1234 2026-04-08 46/2300 2026-04-14 18:12 by 逍遥三郎
[考研] 071000生物学调剂求助 +18 zzzzwww 2026-04-09 21/1050 2026-04-14 15:39 by zs92450
[考研] 材料考研调剂 +29 云木达达 2026-04-11 31/1550 2026-04-13 13:32 by lyh鲁老师
[考研] 295分求调剂 +13 ?要上岸? 2026-04-10 13/650 2026-04-12 15:37 by laoshidan
[考研] 求调剂 +16 张番茄不炒蛋 2026-04-10 17/850 2026-04-12 13:58 by 熬夜成!
[考研] 电气专硕320求调剂 +6 小麻子111 2026-04-10 6/300 2026-04-12 10:54 by lemon6009
[考研] 299求调剂 +8 ZVVZ13 2026-04-08 8/400 2026-04-12 00:40 by 蓝云思雨
[考研] 270求调剂 +14 杨乐369 2026-04-11 14/700 2026-04-11 20:16 by 蓝云思雨
[考研] 调剂 +4 电气300求调剂不 2026-04-08 7/350 2026-04-11 10:44 by 紫曦紫棋
[考研] 中药学调剂 初试324 +4 洋甘菊、 2026-04-10 6/300 2026-04-11 09:41 by gong120082
[考研] 材料与化工调剂 +12 否极泰来2026 2026-04-10 13/650 2026-04-11 00:28 by wangjihu
[考研] 263能源动力专硕求调剂 +4 加大号饭盒袋 2026-04-10 4/200 2026-04-10 20:52 by gong120082
[考研] 中科院总分315求调剂 +8 lallalh 2026-04-09 8/400 2026-04-10 19:30 by dick_runner
[考研] 314求调剂 +18 xhhdjdjsjks 2026-04-09 19/950 2026-04-10 18:53 by HPUCZ
[考研] 298求调剂 +13 钉叮咚冬瓜 2026-04-09 13/650 2026-04-10 15:49 by jiajinhpu
[考研] 085800 能源动力求调剂 +6 阿biu啊啊啊啊啊 2026-04-10 6/300 2026-04-10 15:03 by hemengdong
[考研] 江苏大学 工科调剂 捡漏 +3 Evan_Liu 2026-04-09 5/250 2026-04-10 10:22 by Evan_Liu
[考研] 085601初试330分找调剂 +10 流心奶黄包l 2026-04-09 10/500 2026-04-10 08:14 by Sammy2
[考研] 调剂 +12 月@163.com 2026-04-08 12/600 2026-04-09 14:27 by rl1980
[考研] 考研求调剂 +4 雯??? 2026-04-08 4/200 2026-04-08 21:44 by 土木硕士招生
信息提示
请填处理意见