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【求助】SD大鼠MSC原代贴壁培养
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cuilyn12
木虫
(初入文坛)
应助: 0
(幼儿园)
金币: 1567
帖子: 5
在线: 24.9小时
虫号: 709688
注册: 2009-02-26
[交流]
【求助】SD大鼠MSC原代贴壁培养
最近一个月在养SD大鼠骨髓间充质干细胞,这批原代培养14天后长满单层了,今天一看,都起来不贴壁了,细胞就像被从皿底撕起来一样成片成片的不贴壁,培养基无混浊,很困惑,本来想冻存及用作实验的,我用的培养基是L-DMEM,加10%FBS及1%双抗,恳请各位虫友指教。
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1楼
2009-11-04 15:43:09
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薰衣草儿
荣誉版主
(知名作家)
♡花语の恋♡
应助: 2
(幼儿园)
贵宾: 5.203
金币: 30230.2
散金: 9
红花: 47
沙发: 2
帖子: 8445
在线: 191.5小时
虫号: 772829
注册: 2009-05-17
性别:
MM
专业: 药剂学
管辖:
生物材料
★ ★
cuilyn12(金币
+2
,VIP
+0
):说的好,我会注意的,继续努力!
11-10 16:33
不贴壁,说明实验失败了,从头再来吧,每一步都要小心,严格按照protocol去做!加了双抗不浑浊也可能会有其他污染,另外原代培养制备的时间要尽量缩短,减少暴露空气,祝你成功啊~
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.* ☆.☆° *. ☆ ☆‘‘ ☆。 ☆☆。 *° ‘‘☆ ☆°*‘‘°'☆
3楼
2009-11-04 20:21:36
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travelerchem
至尊木虫
(知名作家)
应助: 0
(幼儿园)
金币: 18954
红花: 3
帖子: 5156
在线: 288.4小时
虫号: 295226
注册: 2006-11-11
性别: GG
专业: 有机分子功能材料化学
★
cuilyn12(金币
+1
,VIP
+0
):谢谢!
11-10 16:27
细胞不贴壁了应该是挂了,原因只能挨个排查了
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(1人)
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2楼
2009-11-04 17:53:38
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sosoyangxz
禁虫
(正式写手)
★ ★
薰衣草儿(金币
+1
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+0
):对的
11-7 10:19
cuilyn12(金币
+1
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+0
):
11-10 16:33
本帖内容被屏蔽
4楼
2009-11-07 08:52:52
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mryingzi
铁虫
(小有名气)
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(幼儿园)
金币: 30.7
散金: 25
红花: 1
帖子: 86
在线: 86.8小时
虫号: 847895
注册: 2009-09-14
专业: 生物医用高分子材料
★ ★
薰衣草儿(金币
+1
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+0
):欢迎交流~
11-9 09:14
cuilyn12(金币
+1
,VIP
+0
):
11-10 16:32
引用回帖:
Originally posted by
sosoyangxz
at 2009-11-7 08:52:
长到80%汇片就需要消化传代了,SD大鼠骨髓间充质干细胞还是很好养的
楼上说的很对,可能是你细胞长的太满,然后就长成一片膜状的东西就不贴壁了,我以前忘记传代就经常出现这种情况。干细胞一定要在80%一下就传代了,不然不但会出现这种情况,而且在非常不利于诱导分化!
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5楼
2009-11-08 23:40:52
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