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cuilyn12

木虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】SD大鼠MSC原代贴壁培养

最近一个月在养SD大鼠骨髓间充质干细胞,这批原代培养14天后长满单层了,今天一看,都起来不贴壁了,细胞就像被从皿底撕起来一样成片成片的不贴壁,培养基无混浊,很困惑,本来想冻存及用作实验的,我用的培养基是L-DMEM,加10%FBS及1%双抗,恳请各位虫友指教。
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sosoyangxz

禁虫 (正式写手)

★ ★
薰衣草儿(金币+1,VIP+0):对的 11-7 10:19
cuilyn12(金币+1,VIP+0): 11-10 16:33
本帖内容被屏蔽

4楼2009-11-07 08:52:52
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查看全部 5 个回答

travelerchem

至尊木虫 (知名作家)


cuilyn12(金币+1,VIP+0):谢谢! 11-10 16:27
细胞不贴壁了应该是挂了,原因只能挨个排查了
2楼2009-11-04 17:53:38
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薰衣草儿

荣誉版主 (知名作家)

♡花语の恋♡

优秀版主

★ ★
cuilyn12(金币+2,VIP+0):说的好,我会注意的,继续努力! 11-10 16:33
不贴壁,说明实验失败了,从头再来吧,每一步都要小心,严格按照protocol去做!加了双抗不浑浊也可能会有其他污染,另外原代培养制备的时间要尽量缩短,减少暴露空气,祝你成功啊~
     .* ☆.☆° *. ☆ ☆‘‘ ☆。      ☆☆。  *° ‘‘☆ ☆°*‘‘°'☆
3楼2009-11-04 20:21:36
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mryingzi

铁虫 (小有名气)

★ ★
薰衣草儿(金币+1,VIP+0):欢迎交流~ 11-9 09:14
cuilyn12(金币+1,VIP+0): 11-10 16:32
引用回帖:
Originally posted by sosoyangxz at 2009-11-7 08:52:
长到80%汇片就需要消化传代了,SD大鼠骨髓间充质干细胞还是很好养的

楼上说的很对,可能是你细胞长的太满,然后就长成一片膜状的东西就不贴壁了,我以前忘记传代就经常出现这种情况。干细胞一定要在80%一下就传代了,不然不但会出现这种情况,而且在非常不利于诱导分化!
5楼2009-11-08 23:40:52
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