| 查看: 622 | 回复: 4 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
lllk2008木虫 (小有名气)
|
[交流]
请教下无菌洗涤收集菌体和细菌计数
|
||
|
前体，都是细菌。 1，关于洗涤菌体时的无菌操作： 有些文献里在进行试验时，需要将细菌增殖以后，离心收集并用灭菌的缓冲液洗涤残余培养液再加入到反应体系，这个过程是如何操作保证无菌的呢？难道是事先将离心管灭菌，在超净台内加入菌液，再移到外面用天平配平后离心，再转入超净台倒去上清液加入新的缓冲液？有这么复杂么？ 2，接上个实验操作，在收集菌体后加入反应体系之前，需要知道菌体密度，这个时候如何比较方便地确定菌体浓度？我看到的文献常用吖啶橙染色后荧光显微镜下计数，还有用DAPI的，但是需要那种特别的滤膜和荧光的激发块，没有查到国内有用这个方法的，还有就是普通的CFU法，但是这个精度和稀释倍数把握以及操作均一度有关，而且耗时，且准确度差。有过来人指点下这两个方法的操作么？或者还有更好的办法。 PS，需要知道浓度的细菌是经离心收集洗涤后悬浮在缓冲液中的细菌。 |
回复此楼» 猜你喜欢
参与限项
已经有4人回复
-
有没有人能给点建议
已经有5人回复
-
假如你的研究生提出不合理要求
已经有12人回复
-
全日制（定向）博士
已经有5人回复
-
萌生出自己或许不适合搞科研的想法，现在跑or等等看？
已经有4人回复
-
Materials Today Chemistry审稿周期
已经有4人回复
-
对氯苯硼酸纯化
已经有3人回复
-
所感
已经有4人回复
-
要不要辞职读博？
已经有7人回复
-
北核录用
已经有3人回复
zhuifeng7000
至尊木虫 (著名写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 15541
- 散金: 32
- 红花: 3
- 帖子: 1832
- 在线: 87.4小时
- 虫号: 598143
- 注册: 2008-09-10
- 专业: 微生物生理与生物化学
2楼2009-10-28 22:15:40
nankou2008
铁杆木虫 (著名写手)
肥南瓜
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 8202
- 散金: 670
- 红花: 1
- 帖子: 1124
- 在线: 364.4小时
- 虫号: 345811
- 注册: 2007-04-14
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
3楼2009-10-29 08:35:37
lllk2008
木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1749.4
- 散金: 37
- 帖子: 208
- 在线: 29小时
- 虫号: 553075
- 注册: 2008-05-02
- 性别: GG
- 专业: 生物地质学
4楼2009-10-29 09:28:39
zhuifeng7000
至尊木虫 (著名写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 15541
- 散金: 32
- 红花: 3
- 帖子: 1832
- 在线: 87.4小时
- 虫号: 598143
- 注册: 2008-09-10
- 专业: 微生物生理与生物化学
5楼2009-10-29 13:49:52