24小时热门版块排行榜    

查看: 429  |  回复: 6
当前主题已经存档。

yoyoyehan

[交流] 关于双酶切

PET28载体双酶切后电泳,怎么就看见一个条带呢,大概4500多bp,酶切37度,5h。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

goodwish

木虫 (正式写手)

木虫书呆子


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你用的什么酶?如果都在多克隆位点处,那么切下的片段太小了,琼脂糖电泳不可能看见这么小的片段的~
生命的海洋里,我是蓝色的一滴
2楼2009-10-27 17:56:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

你用的是什么酶切的啊,楼主把所用酶告诉大伙啊
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2009-10-27 18:47:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoai8039

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1从工具书中(takara目录)查你选择的两个酶能否同时进行双酶切?效率高不高?
2同时酶切或分别酶切的最适条件要查清楚,如温度、buffer,另外注意分别酶切时,要使作用后的酶失活。
3可能两个酶切位点间距太小,导致一条带(几十个碱基之内)观察不到或者跑出视野。
4楼2009-10-27 19:16:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yoyoyehan

引用回帖:
Originally posted by gyesang at 2009-10-27 18:47:
你用的是什么酶切的啊,楼主把所用酶告诉大伙啊

TaKaRa的XboI  和 XhoI  内切酶,
5楼2009-10-28 09:00:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户

同意二楼
金币是赌出来的
6楼2009-10-28 11:56:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haoqian6135

木虫 (正式写手)

蜗牛~


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
不是XboI 是XbalI 吧,两个酶切位点距离太近,跑时间长了就看不见了,建议你跑一会就看看电泳,有可能是可以看见的!
平和悦衲!
7楼2009-10-28 12:19:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yoyoyehan 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见