应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 各位大神，求助大肠杆菌发酵补料C/N比，诱导后什么时候开始补料问题
81/1返回列表
查看: 3260  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者fengyue518将赠送您 50 个金币

fengyue518

铜虫 (初入文坛)

[求助] 各位大神，求助大肠杆菌发酵补料C/N比，诱导后什么时候开始补料问题 已有1人参与

大肠杆菌（工程菌）发酵: 10L罐发酵，配料5L，OD600值10左右开始IPTG诱导（4h左右），3h溶氧开始反弹补糖，诱导后开始补氮源（蛋白胨，酵母膏）；糖联动DO，氮源匀速补料，24h放罐。
问题:1.湿菌体含量只有6%左右，多少算正常？
        2.氮源的补料时机？补料C/N？
        3.诱导时机是不是太早了？什么时候诱导合适？
        4.补糖联动DO还是PH更合适？
麻烦各位大神，谢谢！！

@天使托 发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2024-09-21 16:19:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

死磕人

金虫 (小有名气)

高级发酵工程师
你们是什么性质的单位？我们可以给提供技术服务的
赞一下 回复此楼
好好学习，天天向上！
2楼2024-09-23 10:27:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

后来就算

金虫 (小有名气)
接种量多少？
回复此楼
什么时候积分不是零啊
3楼2024-09-24 08:10:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fengyue518

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 后来就算 at 2024-09-24 08:10:48
接种量多少？

每个罐子接一支试管斜面

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2024-09-25 22:00:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

草木贲华

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

1.湿菌体含量跟你下罐时候的OD600有关；OD600能长到多少基本跟你菌株类型和培养基有关，但是表达蛋白的菌株你可以起码把OD600定在100才比较正常；
2.3 h溶氧就开始上基础培养基里C源应该太少了；
3. 发酵中后期产酸还是产碱？
赞一下 回复此楼
5楼2024-10-09 14:18:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fengyue518

铜虫 (初入文坛)
3h开始溶氧、ph就开始上升，开始补糖。补糖一停止ph，溶氧就开始上升。最近做几批OD值都是70多，现在比较迷惑的是补氮量和补氮时机

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2024-10-14 08:43:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

草木贲华

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by fengyue518 at 2024-10-14 08:43:22
3h开始溶氧、ph就开始上升，开始补糖。补糖一停止ph，溶氧就开始上升。最近做几批OD值都是70多，现在比较迷惑的是补氮量和补氮时机

DO和pH上升是因为基础培养基里C源消耗完了，上升正常；补料停止pH和DO又继续上升就表示补C没有过量，也是正常的补料情况。听你的意思是C/N分开补的，我是建议一起补，摸索出来一个C/N比例然后固定，毕竟补C不足或者过量都有直观地表征，但是补N没有。固定各时段的补料速度，通过转速和通气量控制DO是比较常规的操作。最后表达蛋白的菌株的话，如果是BL21起始你可以以发酵30+h OD600≥130下罐为参考，70左右一般是克隆菌株，表达菌株生长能力会比克隆菌株强不少
赞一下 回复此楼
7楼2024-10-15 08:37:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Mr德古拉

木虫 (正式写手)
不知道您做的产品和发酵配方，按照您的描述，感觉不用太在意碳氮比，可以把氮源全部放入基础料中，只进行碳源补料；还有就是补糖，pH值和溶氧回升之后可以稍等一段时间，观察pH和溶氧的上升幅度，有时候两者都回升后，溶氧可能再次下降，此时可能在代谢部分中间产物
赞一下 回复此楼
越努力，越幸运
8楼2024-11-11 17:09:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 fengyue518 的主题更新
81/1返回列表
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 【0856】化学工程（085602）313 分，本科学科评估A类院校化学工程与工艺，诚求调剂 +7 小刘快快上岸 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:06 by ruiyingmiao
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
[考研] 267一志愿南京工业大学0817化工求调剂 +4 SUICHILD 2026-03-12 4/200 2026-03-13 14:14 by JourneyLucky
[考研] 283求调剂，材料、化工皆可 +8 苏打水7777 2026-03-11 10/500 2026-03-13 09:06 by Linda Hu
[考研] 材料工程,326分，求调剂 +5 KRSLSR 2026-03-10 5/250 2026-03-11 21:07 by kiokin
[考研] 289求调剂 +4 步川酷紫123 2026-03-11 4/200 2026-03-11 19:41 by peike
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-10 9/450 2026-03-11 16:37 by @飒飒飒飒
[考研] 288求调剂 +13 王晓阳- 2026-03-09 18/900 2026-03-11 14:01 by Linda Hu
[考研] 调剂 +5 调剂的考研学生 2026-03-09 5/250 2026-03-10 22:13 by peike
[考研] 086000生物与医药319分求调剂 +4 Tolkien 2026-03-07 8/400 2026-03-10 21:34 by Tolkien
[考研] 求调剂材料专硕293 +6 段_(:з」∠)_ 2026-03-10 6/300 2026-03-10 18:22 by ms629
[考研] 一志愿湖师大化学289求调剂 +5 XMCMM3.14159 2026-03-10 5/250 2026-03-10 15:41 by shangxh
[考研] 一志愿：武汉理工，材料工程，英二数二 总分314 +3 2202020125 2026-03-10 4/200 2026-03-10 13:54 by xiongyaxuan
[考研] 化工284求调剂 +12 小黑想变白 2026-03-07 12/600 2026-03-10 09:17 by Wahxp
[考研] 考研调剂，一志愿山东大学材料与化工，328分，政治51 +5 关你西红柿929 2026-03-08 6/300 2026-03-09 13:50 by 新篇章DFSS
[考研] 083000环境科学与工程调剂 +5 加油呀fxy 2026-03-07 6/300 2026-03-08 21:07 by sdgdsdgd
[考研] 347求调剂 +4 浮云满足 2026-03-07 4/200 2026-03-08 16:46 by 星空星月
[考研] 346分材料求调剂 +5 snow_反季节版 2026-03-07 5/250 2026-03-07 22:40 by Leeding1356
[考研] 化学290求调剂 +3 两颗 西柚 2026-03-07 4/200 2026-03-07 20:55 by macy2011
[考研] 第一志愿上海大学，专业化学工程与技术，总分288，求调剂 +3 1829197082 2026-03-07 3/150 2026-03-07 19:14 by houyaoxu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭