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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 如何给DNA片段加link
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lihaoexe

银虫 (小有名气)

[交流] 如何给DNA片段加link

如题，我想在一些50-100bp之间的DNA片段两端加上一段序列，以便于筛选后做PCR。有没有公司做这样的服务的啊？急求！
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1楼 2009-10-22 13:59:45
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
★
lihaoexe(金币+1,VIP+0): 10-22 22:49
引用回帖:
Originally posted by lihaoexe at 2009-10-22 17:12:

首先，加序列的目的就是便于PCR。其次，用T载体的话，如果在筛选后连T载体，我筛选得到的DNA片段量实在太低不足以做链接，这也正是要PCR扩增的原因；如果是在筛选前连T载体，那么挑单克隆只能得到单一片段，不能 ...

楼主，照你的意思是说你筛片段要用特定的质粒，并且这个质粒的拷贝数不是很多，对吧？
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11楼2009-10-22 21:56:13
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by lihaoexe at 2009-10-22 13:59:
如题，我想在一些50-100bp之间的DNA片段两端加上一段序列，以便于筛选后做PCR。有没有公司做这样的服务的啊？急求！

直接做PCR检测不行吗？是不是你想在不同的序列上加上不同长度的序列以便于检测呢？
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2楼2009-10-22 14:53:50
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lihaoexe

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zhuifeng7000 at 2009-10-22 14:53:

直接做PCR检测不行吗？是不是你想在不同的序列上加上不同长度的序列以便于检测呢？

不行啊，我不知道片段的序列啊，而且我这是DNA片段的混合物，相当于一个文库，我是想在其中筛选出我所要的片段然后PCR，测序
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3楼2009-10-22 15:35:19
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350784478

木虫 (正式写手)
照你这么一说，还是比较麻烦的。
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朝为田舍郎，暮登天子堂。将相本无种，男儿当自强。
4楼2009-10-22 15:54:13
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