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大片段基因扩增不出来，求助 已有3人参与
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课题需要做呼肠孤病毒反向遗传操作系统，扩增片段扩不出来，截断扩依旧不行。温度梯度，模版量和循环次数都做了优化，换了两款高保酶，还是不行。 发自小木虫IOS客户端 |
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云中子2014
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4楼2024-04-06 22:49:55
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xxzdjsw
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3楼2024-04-06 05:14:55
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7楼2024-04-07 02:04:48
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扩增不出来，是指无条带？还是条带大小不对？从描述上看，感觉是扩增不出条带。如果无条带，可以先找一个确定能够扩增出来的基因作为阳性对照，排除模板、试剂或者操作问题，个人遇到过，最好换一批次模板。如果是条带大小不对，推测可能是是片段太长，或许分成三段会好一点。扩出来以后再通过多片段重组或者PCR的方式连起来。 发自小木虫Android客户端 |
8楼2024-04-07 10:02:06
9楼2024-04-07 23:56:10
10楼2024-04-08 01:33:36