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大片段基因扩增不出来,求助 已有3人参与
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课题需要做呼肠孤病毒反向遗传操作系统,扩增片段扩不出来,截断扩依旧不行。温度梯度,模版量和循环次数都做了优化,换了两款高保酶,还是不行。 发自小木虫IOS客户端 |
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扩增不出来,是指无条带?还是条带大小不对?从描述上看,感觉是扩增不出条带。如果无条带,可以先找一个确定能够扩增出来的基因作为阳性对照,排除模板、试剂或者操作问题,个人遇到过,最好换一批次模板。如果是条带大小不对,推测可能是是片段太长,或许分成三段会好一点。扩出来以后再通过多片段重组或者PCR的方式连起来。 发自小木虫Android客户端 |
8楼2024-04-07 10:02:06
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云中子2014
铜虫 (小有名气)
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