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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 大片段基因扩增不出来，求助
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雪落迷城

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 雪落迷城 at 2024-04-08 01:33:36
或许可以试一试用普通的taq酶，如果能扩出来。取取正常体系的十分之一taq酶，加入高保真
...

加入高保真体系再扩增。当然你也可以先把taq酶的扩增产物送测序，如果有条带。最后，换人换换手气，有时候不得不信邪?

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11楼2024-04-08 01:36:21
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学员tll8Yk

新虫 (初入文坛)
请问楼主p出来了嘛，我的也是3kbp，p不出来，用的基因组DNA

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12楼2024-07-19 16:33:24
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YaVirology

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可以试一下在逆转录的时候不加随机引物，加PCR用的引物，然后逆转录产物再用来作PCR的模板。
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13楼2024-07-28 20:22:45
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段伏yyh

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by xzwlove at 2024-07-19 16:33:24
请问楼主p出来了嘛，我的也是3kbp，p不出来，用的基因组DNA

阔出来了，从第一步开始做优化，抽rna，然后做几个样本，留吸光值最好的样，加polya尾，再反转录，然后优化引物，然后用东洋坊的酶，全基因都阔出来了。

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14楼2024-10-03 23:28:12
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