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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 有关培养基的问题
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aga0110125

银虫 (小有名气)
★
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用121灭菌，如果你怕损失葡萄糖的话，就葡萄糖过滤灭菌，待培养基灭菌后加入
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11楼2009-10-21 11:49:46
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含笑天天

银虫 (正式写手)

多方面考虑

★ ★ ★
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amisking(金币+2,VIP+0): 10-26 19:10
1、首先可以肯定的是你培养基灭菌不彻底，但也不能在121度灭菌，这样的话不仅葡萄糖损失，而且产生有毒物质，会抑制菌体的生长，研究就没价值了；土豆培养基配置时，都要先在微波炉里或者电磁炉上加热搅拌，使其在灭菌前就分散均匀，成为悬浊液，然后在进行灭菌。
2、那么高的温度灭菌，还能长菌？是不是你们的灭菌锅温度不准啊？？
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虫虫虫虫
12楼2009-10-21 12:15:56
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easyrider

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 红多多 at 2009-10-21 09:37:
浅浅的覆盖于培养基表面，有些还分布于基内（点状）

有没有可能不是菌啊  会不会是培养基冷热处理后产生的“纹路”什么的啊

如果是纹路，那121灭的就有没有产生的，所以有些说不通丫
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13楼2009-10-21 13:34:54
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easyrider

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 含笑天天 at 2009-10-21 12:15:
1、首先可以肯定的是你培养基灭菌不彻底，但也不能在121度灭菌，这样的话不仅葡萄糖损失，而且产生有毒物质，会抑制菌体的生长，研究就没价值了；土豆培养基配置时，都要先在微波炉里或者电磁炉上加热搅拌，使其在 ...

我现在也有这个考虑，准备用别的实验室的锅同样条件下灭灭看，如果115没出现菌那就确实是锅的问题了，要是仍然有，我只能121灭了，高温长时间下还是可以灭掉的，只是确实葡萄糖损失了
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14楼2009-10-21 13:38:07
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easyrider

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by aga0110125 at 2009-10-21 11:49:
用121灭菌，如果你怕损失葡萄糖的话，就葡萄糖过滤灭菌，待培养基灭菌后加入

这个过滤灭菌是怎样操作的丫？但灭菌后在加入，不是操作中又增加了染菌的可能性了么？我没什么信心，都做了这么多次了，打击很大滴丫！
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15楼2009-10-21 13:41:20
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苹果男

铜虫 (初入文坛)
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引用回帖:
Originally posted by easyrider at 2009-10-21 13:41:

这个过滤灭菌是怎样操作的丫？但灭菌后在加入，不是操作中又增加了染菌的可能性了么？我没什么信心，都做了这么多次了，打击很大滴丫！

用细菌过滤器操作，就是一个注射器加一个滤头，滤头里面加两层0.22um的滤膜，开水煮沸30分钟消毒，然后移至超净台里，将配好的葡萄糖溶液过滤到一个灭菌管，然后加到你的灭菌之后的培养基里面。这么说详细吧
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16楼2009-10-21 13:47:51
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easyrider

金虫 (小有名气)
真是多谢啦，很详尽
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17楼2009-10-21 15:01:10
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houcaixia

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
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amisking(金币+3,VIP+0): 10-26 22:33
如果用的是121度灭菌的话不应该出现这种问题，我做马铃薯培养基也做了几年了，只有长时间培养出现霉菌污染的，没出现过你说的这种情况，你们具体做法是怎么做的？我们只是煮了土豆，过滤要的上清，然后121度灭菌20分钟，如果你怕高压破坏葡萄糖的话可以灭菌过后直接用灭过菌的微孔滤膜和注射器过滤就可以了。
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18楼2009-10-21 15:48:41
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changes

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你的灭菌锅是什么品牌的？用过多长时间，灭其它培养基有没有问题。怀疑是你的灭菌锅有问题。换个别的实验室的试试。
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19楼2009-10-21 16:30:28
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pamela9838

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
会不会是你的培养箱或者室内空气有问题了呢，你找个晚上用紫外灯把你的培养箱灭一下菌
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20楼2009-10-21 17:00:13
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