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njxmhl

木虫 (小有名气)

★ ★ ★
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amisking(金币+2,VIP+0): 10-26 22:33
我去年做PDA时也经常染菌,期间换了N个人做,换了N个高压灭菌锅。最好的结果是一半染菌一半未染菌。后来听说当年的马铃薯得了一种不知什么名的病,最后解决问题的方法你也许是想不到,那就是不要总买一家的,要多买几家,做好标记。总有一家的土豆没问题。
21楼2009-10-22 00:23:04
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hlp0226

木虫 (小有名气)


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灭菌锅里的水干净不干净也很重要
22楼2009-10-22 10:58:27
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zier1011

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★
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amisking(金币+3,VIP+0): 10-26 22:33
1.土豆要先切块、煮沸、捣碎、纱布过滤,取过滤液用
2.加了葡萄糖的培养基要115灭菌
3.你老是染菌的问题应该不是灭菌温度的问题,因为一般情况下,马铃薯培养基115灭菌不会染菌,如果染菌,要找别的原因
4.看了楼上关于土豆生病的说法,感觉豁然开朗呀,说不定是某种耐高温病菌呀
花还香香的
23楼2009-10-22 11:06:46
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easyrider

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by njxmhl at 2009-10-22 00:23:
我去年做PDA时也经常染菌,期间换了N个人做,换了N个高压灭菌锅。最好的结果是一半染菌一半未染菌。后来听说当年的马铃薯得了一种不知什么名的病,最后解决问题的方法你也许是想不到,那就是不要总买一家的,要多 ...

不会吧……我已经换了葡糖和琼脂,确保万无一失了,连土豆也要换么?(⊙o⊙)
24楼2009-10-23 09:47:14
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star1987

木虫 (著名写手)

笑傲江湖

★ ★ ★
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amisking(金币+2,VIP+0): 10-26 22:33
我觉得可能有两个方面的原因:
1.可能是马铃薯上有某中菌,在其内部,不容易被杀死
2.培养箱中有没有其他人培养的菌,如果有的话,就是别人的菌把你的培养基污染了,因为你放在超净工作台上的没染菌
25楼2009-10-23 19:17:05
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easyrider

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by star1987 at 2009-10-23 19:17:
我觉得可能有两个方面的原因:
1.可能是马铃薯上有某中菌,在其内部,不容易被杀死
2.培养箱中有没有其他人培养的菌,如果有的话,就是别人的菌把你的培养基污染了,因为你放在超净工作台上的没染菌

培养箱里没有任何其他菌种,是新的,我还用甲醛熏蒸过,这点排除了,马铃薯的问题确实有点让人介意,之前不是没想过,但还以为是我想得太多,看来确实也有可能哦!
26楼2009-10-23 23:25:30
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easyrider

金虫 (小有名气)

最新情况

感谢大家提出的建设性意见,都很宝贵哦!告诉大家一个比较欣慰的消息,昨天新做的一组培养基,采用了间歇式灭菌(也是一个前辈建议的),到现在为止培养基已经在培养箱内安全度过28小时了,没有出现染菌情况,我觉得这是不错的方法,也和大家分享下,希望以后遇到和我一样问题的人,可以把这个方法做一定参考吧。
针对我的实验,即115℃灭菌20分钟,停10分钟,再来一次
27楼2009-10-23 23:32:23
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zhouzhou_3006

木虫 (著名写手)


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121度灭30 min也可以的啊,葡萄糖是有些损失,但不会太多,应该不会对菌体生长产生很大的影响,如果不放心你就把葡萄糖单独灭菌,用的时候再加进入
为梦想努力。
28楼2009-10-24 14:18:04
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sy53128

木虫 (小有名气)


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新鲜马铃薯预处理了吗?
29楼2009-10-26 16:32:30
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nankou2008

铁杆木虫 (著名写手)

肥南瓜


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是不是超净台污染了?清理一下
湖深而静溪浅而鸣
30楼2009-10-26 17:06:03
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