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easyrider

金虫 (小有名气)

[交流] 有关培养基的问题

基于本人是新手,至少是实验上的新手,遇到一个很头疼的问题,在这里希望能得到高人的指导
      本人需要配置培养毛霉用的马铃薯培养基,使用新鲜马铃薯+葡萄糖+琼脂,115℃高温灭菌20分钟,前面工作完全按照常规配制方法进行,然而,灭菌后放入培养箱内30摄氏度(28-37度均用过)检测灭菌情况,发现总是会长出一层米黄色的菌,浅浅的覆盖于培养基表面,有些还分布于基内(点状),即培养基中间和表面都有,十几天做了8次了,依旧染菌,开始觉得是灭菌不彻底,改到30分钟后入培养箱检测灭菌情况,依旧长出这些东西,我只觉得应该是种兼性厌氧菌,但不知道来源,后来我试着用121℃灭菌30分钟,目前(两天内)好象没有长出菌,但考虑到培养基含葡萄糖,121度下其损失量增大,可能会影响接种菌的生长,现在不知道用什么对策好了,这该死的菌啊 !大侠们帮忙分析下吧!

PS1:我配置的有铺了斜面的试管及锥瓶,均染菌了,最近一次放在超净工作台上的没有放入培养箱的却没发现这种菌,我觉得可能是室温不适合它的生长吧!
PS2:染菌参考类型:
      115℃灭菌20分钟  操作台(室温)+培养箱(30-37)  均染菌;
      121℃灭菌20分钟  操作台(室温)+培养箱(30-37)  均染菌;
      115℃灭菌30分钟  操作台(室温)---未染;培养箱(30-37)---染菌;
      121℃灭菌30分钟  操作台(室温)+培养箱(30-37)均未染菌。
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easyrider

金虫 (小有名气)

最新情况

感谢大家提出的建设性意见,都很宝贵哦!告诉大家一个比较欣慰的消息,昨天新做的一组培养基,采用了间歇式灭菌(也是一个前辈建议的),到现在为止培养基已经在培养箱内安全度过28小时了,没有出现染菌情况,我觉得这是不错的方法,也和大家分享下,希望以后遇到和我一样问题的人,可以把这个方法做一定参考吧。
针对我的实验,即115℃灭菌20分钟,停10分钟,再来一次
27楼2009-10-23 23:32:23
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查看全部 34 个回答

lvtd

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你看下是什么菌啊,不同的细菌的生长温度也是不同的。
tobeornottobe,thisisaquestion!
2楼2009-10-21 00:04:13
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easyrider

金虫 (小有名气)

我现在就是不能确定是什么菌,照了些照片,但是不知道怎么发上来
3楼2009-10-21 00:14:17
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+1,VIP+0): 10-26 19:09
121℃灭20min怎么还会染菌的,很奇怪!你配置培养基用的新鲜马铃薯是块状的还是粉末呢?如果是块状的话会不会是因为“内部”含有某些兼性厌氧的菌,从而导致灭菌不完全而染菌的,如果是这样的话把块状的研磨成粉末配置培养基再灭菌试试。
4楼2009-10-21 00:15:55
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