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easyrider

金虫 (小有名气)

[交流] 有关培养基的问题

基于本人是新手,至少是实验上的新手,遇到一个很头疼的问题,在这里希望能得到高人的指导
      本人需要配置培养毛霉用的马铃薯培养基,使用新鲜马铃薯+葡萄糖+琼脂,115℃高温灭菌20分钟,前面工作完全按照常规配制方法进行,然而,灭菌后放入培养箱内30摄氏度(28-37度均用过)检测灭菌情况,发现总是会长出一层米黄色的菌,浅浅的覆盖于培养基表面,有些还分布于基内(点状),即培养基中间和表面都有,十几天做了8次了,依旧染菌,开始觉得是灭菌不彻底,改到30分钟后入培养箱检测灭菌情况,依旧长出这些东西,我只觉得应该是种兼性厌氧菌,但不知道来源,后来我试着用121℃灭菌30分钟,目前(两天内)好象没有长出菌,但考虑到培养基含葡萄糖,121度下其损失量增大,可能会影响接种菌的生长,现在不知道用什么对策好了,这该死的菌啊 !大侠们帮忙分析下吧!

PS1:我配置的有铺了斜面的试管及锥瓶,均染菌了,最近一次放在超净工作台上的没有放入培养箱的却没发现这种菌,我觉得可能是室温不适合它的生长吧!
PS2:染菌参考类型:
      115℃灭菌20分钟  操作台(室温)+培养箱(30-37)  均染菌;
      121℃灭菌20分钟  操作台(室温)+培养箱(30-37)  均染菌;
      115℃灭菌30分钟  操作台(室温)---未染;培养箱(30-37)---染菌;
      121℃灭菌30分钟  操作台(室温)+培养箱(30-37)均未染菌。
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苹果男

铜虫 (初入文坛)


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引用回帖:
Originally posted by easyrider at 2009-10-21 13:41:

这个过滤灭菌是怎样操作的丫?但灭菌后在加入,不是操作中又增加了染菌的可能性了么?我没什么信心,都做了这么多次了,打击很大滴丫!

用细菌过滤器操作,就是一个注射器加一个滤头,滤头里面加两层0.22um的滤膜,开水煮沸30分钟消毒,然后移至超净台里,将配好的葡萄糖溶液过滤到一个灭菌管,然后加到你的灭菌之后的培养基里面。这么说详细吧
16楼2009-10-21 13:47:51
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