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easyrider

金虫 (小有名气)

[交流] 有关培养基的问题

基于本人是新手,至少是实验上的新手,遇到一个很头疼的问题,在这里希望能得到高人的指导
      本人需要配置培养毛霉用的马铃薯培养基,使用新鲜马铃薯+葡萄糖+琼脂,115℃高温灭菌20分钟,前面工作完全按照常规配制方法进行,然而,灭菌后放入培养箱内30摄氏度(28-37度均用过)检测灭菌情况,发现总是会长出一层米黄色的菌,浅浅的覆盖于培养基表面,有些还分布于基内(点状),即培养基中间和表面都有,十几天做了8次了,依旧染菌,开始觉得是灭菌不彻底,改到30分钟后入培养箱检测灭菌情况,依旧长出这些东西,我只觉得应该是种兼性厌氧菌,但不知道来源,后来我试着用121℃灭菌30分钟,目前(两天内)好象没有长出菌,但考虑到培养基含葡萄糖,121度下其损失量增大,可能会影响接种菌的生长,现在不知道用什么对策好了,这该死的菌啊 !大侠们帮忙分析下吧!

PS1:我配置的有铺了斜面的试管及锥瓶,均染菌了,最近一次放在超净工作台上的没有放入培养箱的却没发现这种菌,我觉得可能是室温不适合它的生长吧!
PS2:染菌参考类型:
      115℃灭菌20分钟  操作台(室温)+培养箱(30-37)  均染菌;
      121℃灭菌20分钟  操作台(室温)+培养箱(30-37)  均染菌;
      115℃灭菌30分钟  操作台(室温)---未染;培养箱(30-37)---染菌;
      121℃灭菌30分钟  操作台(室温)+培养箱(30-37)均未染菌。
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houcaixia

金虫 (小有名气)

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amisking(金币+3,VIP+0): 10-26 22:33
如果用的是121度灭菌的话不应该出现这种问题,我做马铃薯培养基也做了几年了,只有长时间培养出现霉菌污染的,没出现过你说的这种情况,你们具体做法是怎么做的?我们只是煮了土豆,过滤要的上清,然后121度灭菌20分钟,如果你怕高压破坏葡萄糖的话可以灭菌过后直接用灭过菌的微孔滤膜和注射器过滤就可以了。
18楼2009-10-21 15:48:41
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lvtd

金虫 (小有名气)


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你看下是什么菌啊,不同的细菌的生长温度也是不同的。
tobeornottobe,thisisaquestion!
2楼2009-10-21 00:04:13
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easyrider

金虫 (小有名气)

我现在就是不能确定是什么菌,照了些照片,但是不知道怎么发上来
3楼2009-10-21 00:14:17
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
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amisking(金币+1,VIP+0): 10-26 19:09
121℃灭20min怎么还会染菌的,很奇怪!你配置培养基用的新鲜马铃薯是块状的还是粉末呢?如果是块状的话会不会是因为“内部”含有某些兼性厌氧的菌,从而导致灭菌不完全而染菌的,如果是这样的话把块状的研磨成粉末配置培养基再灭菌试试。
4楼2009-10-21 00:15:55
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