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xj22667

银虫 (小有名气)

[交流] 求助小蛋白如何电泳检测

最近做蛋白的表达纯化,但苦于蛋白较小不到20KD,每次15%的SDS-PAGE跑一个小时就糊了,看不清目的带,但western检测已经诱导出来,但看不到目的带无法后续纯化,望有经验的虫友们不吝赐教!不胜感激

[ Last edited by xj22667 on 2009-10-17 at 17:35 ]
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xj22667

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by snoopyzxx at 2009-10-17 20:10:
小分子肯定要用tricine-SDS-PAGE啊,没有选择的。
和SDS-PAGE相比,只是胶的成分和缓冲液不一样,都很简单的,没什么神秘的。
楼主就大胆的做吧。
给楼主一个protocol。

Tricine SDS-PAGE电泳
1、Gel buff ...

谢谢你的建议!这个配方您试过吗  小蛋白液能跑的很清楚吗
你做小蛋白也用这种方法吗?
7楼2009-10-19 19:44:40
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wlt728

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你可以跑一下tricne-page,小分子量的蛋白用这个方法比较好
I am not a hero , but I served with heroes!
2楼2009-10-17 18:57:52
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xj22667

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by wlt728 at 2009-10-17 18:57:
你可以跑一下tricne-page,小分子量的蛋白用这个方法比较好

请问您跑过么 效果则们样
3楼2009-10-17 18:59:50
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wlt728

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
没跑过,我们的蛋白分子量比较大些,论坛里有关于我说的方法。你可以搜下!自己好好看下!
I am not a hero , but I served with heroes!
4楼2009-10-17 19:53:11
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