| 查看: 764 | 回复: 10 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
求助小蛋白如何电泳检测
|
|||
|
最近做蛋白的表达纯化，但苦于蛋白较小不到20KD，每次15%的SDS-PAGE跑一个小时就糊了，看不清目的带，但western检测已经诱导出来，但看不到目的带无法后续纯化，望有经验的虫友们不吝赐教！不胜感激 [ Last edited by xj22667 on 2009-10-17 at 17:35 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
291分调剂
已经有9人回复
-
调剂求收留
已经有34人回复
-
291 求调剂
已经有38人回复
-
22408 312求调剂
已经有17人回复
-
一志愿华中农业071010，320求调剂
已经有6人回复
-
290调剂生物0860
已经有41人回复
-
291求调剂
已经有3人回复
-
211本科材料化工求调剂
已经有23人回复
-
山东省基金2026
已经有9人回复
-
药学求调剂
已经有13人回复
snoopyzxx
木虫 (著名写手)
- BioEPI: 4
- 应助: 49 (小学生)
- 金币: 2994.6
- 散金: 1276
- 红花: 43
- 帖子: 2258
- 在线: 277.2小时
- 虫号: 548497
- 注册: 2008-04-19
- 性别: MM
- 专业: 全球变化生态学
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+3,VIP+0): 10-19 20:21
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+3,VIP+0): 10-19 20:21
|
小分子肯定要用tricine-SDS-PAGE啊，没有选择的。 和SDS-PAGE相比，只是胶的成分和缓冲液不一样，都很简单的，没什么神秘的。 楼主就大胆的做吧。 给楼主一个protocol。 Tricine SDS-PAGE电泳 1、Gel buffer Tris36.33g，SDS 0.3g，加适量水，调pH至8.45，定容至100ml。 2、阳极缓冲液 Tris 12.1g，pH8.9 3、阴极缓冲液 Tris 6.05g，tricine 8.96g，SDS 0.5g，定容至500ml，可不调pH，即8.0。 4、配方 15％分离胶（ml） 浓缩胶（ml） Gel buffer 3.33 1 ddH2O 0.5 2.2 30%丙烯酰胺 5 0.8 甘油 1.06 0 10%过硫酸铵 0.1 0.05 TEMED 0.005 0.005 |
5楼2009-10-17 20:10:50
wlt728
铁杆木虫 (著名写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 38 (小学生)
- 金币: 13652.1
- 散金: 977
- 红花: 5
- 沙发: 1
- 帖子: 2130
- 在线: 344.5小时
- 虫号: 275024
- 注册: 2006-08-27
- 专业: 抗体工程学
2楼2009-10-17 18:57:52
3楼2009-10-17 18:59:50
wlt728
铁杆木虫 (著名写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 38 (小学生)
- 金币: 13652.1
- 散金: 977
- 红花: 5
- 沙发: 1
- 帖子: 2130
- 在线: 344.5小时
- 虫号: 275024
- 注册: 2006-08-27
- 专业: 抗体工程学
4楼2009-10-17 19:53:11
