24小时热门版块排行榜    

查看: 664  |  回复: 2
【悬赏金币】回答本帖问题,作者hsjzhhh将赠送您 5 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

hsjzhhh

新虫 (初入文坛)

[求助] qPCR为什么数据总是有问题,求助求助!!! 已有1人参与

我提取的粪便总DNA然后做qPCR比较目标菌的丰度,我通用引物选择的338F和518R,特异性引物是师姐之前做过的序列相同,但是!!每次特异性引物都扩不出来,峰很小,ct在39左右,通用引物熔解曲线倒是正常,不过ct值在9左右,而且数据都很匀,这到底是怎么回事呀,我应该怎么调整才能做出来呀!!!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoys66

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可能你目标菌的丰度太低了
ct值在15-35比较正常
3楼2023-11-14 10:53:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 3 个回答

momo莫模

新虫 (小有名气)

峰低应该是因为通用的那个太高了,纵坐标是扩增效率吧?我以前用不同种类的探针就会有这种情况。你直接把纵坐标锁死在特异性引物的最高值就好了。

发自小木虫Android客户端
2楼2023-10-31 14:05:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
信息提示
请填处理意见