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BSA封闭磁珠立马出现聚沉
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我的磁珠和cdna在PBST中（PH7.4）37度偶联4.5h,之后加入含1%BSA的PBST（PH7.4）封闭时 立马聚沉，而且颜色由土黄色变成了铁锈红，这是为什么呢？ @liubin 发自小木虫IOS客户端 |
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2楼2023-10-07 15:37:40
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我试过PH6.0的条件偶联后加入含BSA的PBST，依然是立刻出现沉淀。 哪怕是刚取出的磁珠母液加入封闭液也是立马沉淀。这是为什么呢？ 而且我不论是在PH7.4还是6.0的体系，都偶联不上适配体 发自小木虫IOS客户端 |
3楼2023-10-08 13:34:43
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4楼2023-10-10 12:05:17
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5楼2023-10-10 12:07:25
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偶联结束清洗了。 现在不是明显的聚沉，就是从之前的那种融化的巧克力的丝滑感变成稍微沙沙的感觉，颜色也氧化变深棕红。目前最大的问题是，磁珠偶联不上适配体，而且偶联液上清的吸光值不降反增，这是为什么呢？ 发自小木虫IOS客户端 |
6楼2023-10-15 00:07:44
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-?EDC可能失活，建议尝试新鲜配制的?EDC。 -?Sulfo-NHS中间体可能已经水解，EDC和SulfoNHS?需即配即用。 -?蛋白量不足，建议提高包被浓度 -?羧基活化后直接加入蛋白。 -?避免引入带有氨基基团的蛋白及复合物引起竞争反应 -?调整包被缓冲液或?PH。 发自小木虫Android客户端 |
7楼2023-10-15 10:06:10
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8楼2023-10-15 10:07:27
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Jarnnney9楼2023-10-15 10:09:33
10楼2023-11-03 00:39:04