应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 载体酶切验证
汕头大学海洋科学接受调剂
201/2返回列表12下一页
查看: 2089  |  回复: 19
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

落泪天使

新虫 (初入文坛)

[交流] 载体酶切验证

我将自己拿到的片段插入PBI121载体中，PCR验证时，我的目的条带有，但是酶切验证的时候，没有条带，为什么？

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-1 at 13:07 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-09-30 10:52:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+3,VIP+0): 10-7 21:22
引用回帖:
Originally posted by 落泪天使 at 2009-9-30 10:52:
我将自己拿到的片段插入PBI121载体中，PCR验证时，我的目的条带有，但是酶切验证的时候，没有条带，为什么？

原因可能有很多。
1.PCR验证的时候有没有做个阴性对照？如果阴性对照也能拉出目的条带，这说明片段可能没插入。
2.片段可能插入了，但是酶切的有问题。如酶，Buffer等，或者在酶切位点的选择上。
赞一下(11人) 回复此楼
2楼2009-09-30 11:07:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anik

银虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1,VIP+0): 10-7 21:22
酶切位点是否正确？
PCR有没有作阴性对照？
赞一下(11人) 回复此楼
3楼2009-09-30 11:19:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunqx

木虫 (著名写手)
PCR反应体系被污染了
赞一下 回复此楼
4楼2009-09-30 14:30:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kitty8682

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
再看一下酶切位点有没有问题吧
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2009-09-30 15:50:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

695

木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这个问题我在做5RACE的时候也碰到过，还不止一两次，不过我没怎么追究，好在我找到了两个正确的质粒，祝你好运
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2009-09-30 23:47:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

plantst5928

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2,VIP+0): 10-7 21:22
这很正常，原因也很多，可能是你的酶切位点的问题，也可能是你的酶切的时候的试剂的问题，或者就是你的PCR验证的时候的条带不是你的目的带，如果目的带太大，最好不要用M13引物验证，用基因的特异引物去验证。
赞一下(11人) 回复此楼
7楼2009-10-04 23:00:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lzhwin

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
PCR的假阳性吧？比起菌落PCR我更相信酶切鉴定的结果
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2009-10-06 13:16:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

寒山拾得

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
用载体上的序列，进行PCR验证最好。
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2009-10-06 14:10:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人
PCR不准的
回复此楼
小木虫之有关部门负责人
10楼2009-10-06 14:12:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 落泪天使 的主题更新
201/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 药学求调剂 +11 喽哈加油 2026-04-14 13/650 2026-04-14 21:14 by qingfeng258
[考研] 290调剂生物0860 +34 哇哈哈，。 2026-04-11 40/2000 2026-04-14 20:45 by xiaoyidao129
[考研] 考研求调剂 +6 ban班小七 2026-04-11 6/300 2026-04-14 14:06 by 哆啦A梦只是个梦
[考研] 297求调剂 +23 ORCHID1 2026-04-10 26/1300 2026-04-14 13:52 by 陈皮皮
[考研] 105500药学求调剂 +4 x_skys 2026-04-12 4/200 2026-04-14 13:37 by rndfc
[考研] 085600材料与化工349分求调剂 +16 李木子啊哈哈 2026-04-12 17/850 2026-04-14 09:11 by fenglj492
[考研] 290求调剂 +18 柯淮然 2026-04-12 20/1000 2026-04-13 12:56 by cyh—315
[考研] 调剂 +10 只叙离别辞 2026-04-09 12/600 2026-04-11 20:57 by 逆水乘风
[考研] 调剂 +6 青灯不负 2026-04-09 6/300 2026-04-11 20:35 by dongdian1
[考研] 359求调剂 +5 胃痉挛累了 2026-04-11 5/250 2026-04-11 19:55 by lbsjt
[考研] 农学0904 312求调剂 +6 Say Never 2026-04-10 6/300 2026-04-11 10:33 by wwj2530616
[考研] 085410-273求调剂 +6 X1999 2026-04-10 6/300 2026-04-11 10:32 by Delta2012
[考研] 一志愿985机械学硕380求调剂 +5 关关雎鸠10 2026-04-11 5/250 2026-04-11 10:10 by 知念。A
[考研] 346，工科求调剂 +3 moser233 2026-04-09 3/150 2026-04-11 10:04 by zhq0425
[考研] 调剂 +19 小张ZA 2026-04-10 20/1000 2026-04-10 22:08 by 猪会飞
[考研] 309求调剂 +14 wdhw 2026-04-10 15/750 2026-04-10 21:06 by zhouxiaoyu
[考研] 吉大计算机技术331分，英语六级，求调剂 +3 峰峰021116 2026-04-09 3/150 2026-04-10 20:01 by chemisry
[考研] 22408 366分，本科211，一志愿西工大 +4 Rubt 2026-04-09 4/200 2026-04-10 19:51 by chemisry
[考研] 材料307分求大佬组收留 +17 Hll胡 2026-04-07 17/850 2026-04-09 10:53 by liuhuiying09
[考研] 求调剂 +3 猪肉墩粉条cc 2026-04-08 4/200 2026-04-09 10:05 by 猪肉墩粉条cc
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭