应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 载体酶切验证
201/2返回列表12下一页
查看: 2086  |  回复: 19
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

落泪天使

新虫 (初入文坛)

[交流] 载体酶切验证

我将自己拿到的片段插入PBI121载体中，PCR验证时，我的目的条带有，但是酶切验证的时候，没有条带，为什么？

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-1 at 13:07 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-09-30 10:52:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+3,VIP+0): 10-7 21:22
引用回帖:
Originally posted by 落泪天使 at 2009-9-30 10:52:
我将自己拿到的片段插入PBI121载体中，PCR验证时，我的目的条带有，但是酶切验证的时候，没有条带，为什么？

原因可能有很多。
1.PCR验证的时候有没有做个阴性对照？如果阴性对照也能拉出目的条带，这说明片段可能没插入。
2.片段可能插入了，但是酶切的有问题。如酶，Buffer等，或者在酶切位点的选择上。
赞一下(11人) 回复此楼
2楼2009-09-30 11:07:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anik

银虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1,VIP+0): 10-7 21:22
酶切位点是否正确？
PCR有没有作阴性对照？
赞一下(11人) 回复此楼
3楼2009-09-30 11:19:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunqx

木虫 (著名写手)
PCR反应体系被污染了
赞一下 回复此楼
4楼2009-09-30 14:30:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kitty8682

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
再看一下酶切位点有没有问题吧
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2009-09-30 15:50:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

695

木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这个问题我在做5RACE的时候也碰到过，还不止一两次，不过我没怎么追究，好在我找到了两个正确的质粒，祝你好运
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2009-09-30 23:47:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

plantst5928

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2,VIP+0): 10-7 21:22
这很正常，原因也很多，可能是你的酶切位点的问题，也可能是你的酶切的时候的试剂的问题，或者就是你的PCR验证的时候的条带不是你的目的带，如果目的带太大，最好不要用M13引物验证，用基因的特异引物去验证。
赞一下(11人) 回复此楼
7楼2009-10-04 23:00:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lzhwin

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
PCR的假阳性吧？比起菌落PCR我更相信酶切鉴定的结果
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2009-10-06 13:16:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

寒山拾得

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
用载体上的序列，进行PCR验证最好。
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2009-10-06 14:10:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人
PCR不准的
回复此楼
小木虫之有关部门负责人
10楼2009-10-06 14:12:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 落泪天使 的主题更新
201/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 339求调剂 +3 hanwudada 2026-04-12 3/150 2026-04-12 21:43 by lbsjt
[考研] 0856专硕求调剂 希望是a区院校 +22 好好休息好不好 2026-04-09 25/1250 2026-04-12 17:09 by ajpv风雷
[考研] 求调剂 +16 张番茄不炒蛋 2026-04-10 17/850 2026-04-12 13:58 by 熬夜成！
[考研] 化工调剂求导师收留！一志愿失利，踏实肯干，有植物提取科研经历 +20 yzyzx 2026-04-09 21/1050 2026-04-12 00:12 by 小小小小啦啦啦
[考研] 材料工程日语考生求调剂 +7 0856?调剂 2026-04-10 7/350 2026-04-11 21:33 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂 +6 archer.. 2026-04-09 8/400 2026-04-11 10:55 by zhq0425
[考研] 087100初试311求调剂 +4 任雅琴 2026-04-09 4/200 2026-04-11 10:33 by zhq0425
[考研] 吉大计算机技术331分，英语六级，求调剂 +3 峰峰021116 2026-04-09 3/150 2026-04-10 20:01 by chemisry
[考研] 中科院总分315求调剂 +8 lallalh 2026-04-09 8/400 2026-04-10 19:30 by dick_runner
[考研] 0858求调剂 5+5 Gky09300550， 2026-04-10 8/400 2026-04-10 19:13 by chemisry
[考研] 一志愿矿大，材料工程专硕314分，0856可调都可以 +15 无懈可击的巨人 2026-04-09 15/750 2026-04-10 18:10 by hmn_wj
[考研] 301求调剂 +5 149. 2026-04-10 5/250 2026-04-10 15:45 by 柴小白
[考研] 297求调剂 +27 GENJIOW 2026-04-07 30/1500 2026-04-09 23:20 by wolf97
[考研] 311求调剂 +6 surte 2026-04-08 13/650 2026-04-09 14:00 by surte
[考研] 293分求调剂，外语为俄语 +7 加一一九 2026-04-07 10/500 2026-04-08 20:14 by yutian743
[考研] 304求调剂 +10 素年祭语 2026-04-06 17/850 2026-04-08 09:05 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿西南090202求调剂 +4 在线求有学上 2026-04-07 4/200 2026-04-07 19:47 by biomichael
[考研] 22408 调剂材料 +7 我叫ez 2026-04-06 8/400 2026-04-07 17:12 by 蓝云思雨
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-04-07 11/550 2026-04-07 15:13 by shdgaomin
[考研] 材料调剂 +17 小刘同学吖吖 2026-04-06 18/900 2026-04-07 11:41 by 诗与自由
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭