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010咦

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE

用BL21表达目的蛋白后，取未加IPTG诱导的菌液1ml，离心倒掉上清，将80ul的1×PBS和10ul的PMSF混匀后加入沉淀中，将沉淀重悬以后加入20ul的loading buffer沸水浴10分钟，然后离心10分钟，跑SDS-PAGE点样时，有的样品不会下沉到胶孔中，有的样品却可以，是哪个处理步骤出现问题呢？怎么解决?已经排除不是胶的问题。

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1楼 2023-04-29 22:08:35
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Glenice Y

新虫 (正式写手)
应该是某些菌体浓度过高，导致菌体粘稠不好上样，你可以多加一些PBS按照你的方案在做，相当于扩大体积

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2楼2023-05-02 19:49:58
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