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汕头大学海洋科学接受调剂
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melodyxin

铜虫 (小有名气)

[交流] 关于含卡那抗性载体的菌株生长缓慢问题

我将含有pET28a重组质粒的BL21菌株的甘油菌划线到平板活化后,挑单菌至5ml的LB(加50ug/ml卡那)过夜培养。可是培养了14h,菌液还是很稀很稀;看起来OD600不会超过0.4.

这是怎么回事啊?

请大家指教。。。。。。
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by melodyxin at 2009-9-26 10:00:
另外,如果直接从甘油管接种20ul到5ml的LB(含卡那)中,长势就还好。相当奇怪。

是不是挑菌的时候没挑进去?液体接种当然就保险些。
Thank-you,so-blue.
6楼2009-09-26 10:23:56
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melodyxin

铜虫 (小有名气)

很急,求教!!!
2楼2009-09-26 09:20:54
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

★ ★
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350784478(金币+1,VIP+0):感谢参与 9-26 10:03
想问下你活化用的平板放卡那了吗?
不知道你的表达菌存放多久了,保存重组质粒的菌株最好用DH5α,用表达菌株存重组质粒,时间久了,会导致质粒降解,放卡那当然就不长了。
建议用重组质粒再转化BL21.
Thank-you,so-blue.
3楼2009-09-26 09:45:14
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melodyxin

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2009-9-26 09:45:
想问下你活化用的平板放卡那了吗?
不知道你的表达菌存放多久了,保存重组质粒的菌株最好用DH5α,用表达菌株存重组质粒,时间久了,会导致质粒降解,放卡那当然就不长了。
建议用重组质粒再转化BL21.

啊?重新转化啊?
我放了一个半月,平板是放了卡那的。
4楼2009-09-26 09:57:40
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